Beschreibung
Injection volume and solvent choice are among the many factors that contribute to good liquid chromatography. If we inject too much, we can drastically degrade peak shape by causing our peaks to front. At the same time, we want to choose an injection solvent that matches our initial mobile phase conditions.
Weitere Informationen
- HPLC and UHPLC Frequently Asked Questions
- Solvent Mismatch Effects on Peak Shape for LC Analysis
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Transkript
Vielen Dank für Ihr Interesse an unserem aktuellen Restek Tipp. Heute möchte ich darüber sprechen, wie das Injektionsvolumen und die Wahl des Lösemittels die Peakform beeinflussen können. Wie wir wissen, gibt es in der Flüssigchromatografie eine Reihe von Faktoren, die an der Entstehung schlechter Peakformen beteiligt sein können. Dabei sind das Injektionsvolumen und die Wahl des Lösemittels zwei Dinge, die wir uns ansehen können, ohne viele andere chromatografische Parameter zu ändern.
In Bezug auf das Injektionsvolumen gilt als gute Faustregel, dass es zwischen 1 und 5 % des Gesamtvolumens der Säule betragen sollte. Wenn wir 5 % überschreiten, sehen wir erste Anzeichen von Peakfronting, was bedeutet, dass wir uns der maximalen Kapazität nähern und anfangen, die Säule zu überladen. Durch Verringerung des Injektionsvolumens auf den gewünschten Bereich zwischen 1 und 5 Prozent können wir diese negative Auswirkung auf die Peakform wenigstens teilweise rückgängig machen.
Als nächstes können wir versuchen, das Lösemittel für unsere Probe zu ändern, so dass es der anfänglichen mobilen Phase entspricht. Dadurch werden Inkompatibilitäten zwischen Probe und Lösemittel vermieden, und wir können das Injektionsvolumen erhöhen, ohne Peakfronting zu beobachten, was ein Anzeichen von Probenüberladung ist.
Das sind nur ein paar Möglichkeiten, die Sie in Ihrem Labor testen können, um die Peakform zu verbessern, ohne viele andere chromatografische Parameter zu ändern. Nochmals vielen Dank für Ihr Interesse an unserem aktuellen Restek Tipp.
