{"id":43656,"date":"2021-01-12T00:00:00","date_gmt":"2021-01-12T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/discover.restek.com\/uncategorized\/tipps-zur-herstellung-von-standards-fur-kalibrierkurven-und-zur-vermeidung-von-fehlerquellen\/"},"modified":"2026-01-28T22:34:19","modified_gmt":"2026-01-28T22:34:19","slug":"tipps-zur-herstellung-von-standards-fur-kalibrierkurven-und-zur-vermeidung-von-fehlerquellen","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/artikel\/gnar3169-de\/tipps-zur-herstellung-von-standards-fur-kalibrierkurven-und-zur-vermeidung-von-fehlerquellen","title":{"rendered":"Tipps zur Herstellung von Standards f\u00fcr Kalibrierkurven und zur Vermeidung von Fehlerquellen"},"content":{"rendered":"\n
Korrekte Kalibrierdaten sind die Grundlage jeder Quantifizierung. Aber hinter jeder guten Kalibrierkurve steckt eine enorme Menge Arbeit. Hinter jeder Ecke lauern zahlreiche potenzielle Fehlerquellen. Deshalb ist es wichtig, sich damit vertraut zu machen, wie man Genauigkeit und Richtigkeit am besten sicherstellen kann. Um Frustrationen \u00fcber fehlerhafte Kalibrierkurven, Projektverz\u00f6gerungen und Verschwendung von Zeit und Ressourcen zu vermeiden, m\u00f6chten wir Ihnen einige Tipps geben, die Ihnen helfen sollen, einige der Fallen zu vermeiden, die bei der Herstellung von Standards f\u00fcr Kalibrierkurven auftreten k\u00f6nnen. Obwohl es viele Ger\u00e4teprobleme gibt, die zu einer inakzeptablen Kalibrierkurve f\u00fchren k\u00f6nnen, befasst sich dieser Artikel haupts\u00e4chlich mit der Herstellung und Lagerung der Standards.<\/p>\n\n\n\n
Vor Beginn sollten Sie sicherstellen, dass Sie mit den Regeln und Richtlinien (SOPs, Vorschriften, Standardrichtlinien usw.) Ihres Unternehmens vertraut sind und die SDB sowie die Entsorgungsauflagen f\u00fcr die von Ihnen verwendeten Chemikalien kennen. Die Priorisierung von Compliance und Sicherheit ist entscheidend f\u00fcr effizientes und effektives Arbeiten. Wenn Sie aufgrund dieser Tipps M\u00f6glichkeiten zur Verbesserung bestehender Praktiken sehen, sollten Sie deshalb zun\u00e4chst mit Ihrem Vorgesetzten sprechen, bevor Sie irgendwelche Verfahren \u00e4ndern.<\/p>\n\n\n\n
Korrekte Nutzung von Ger\u00e4ten und Ausr\u00fcstung<\/h2>\n\n\n\n
W\u00e4hrend die meisten Methoden die Verbindungen und Konzentrationen vorschreiben, die Sie herstellen m\u00fcssen, liefern sie normalerweise keine Best Practices f\u00fcr das eigentliche Mischen Ihrer Standards. Der erste Schritt bei der Erstellung einer guten Standardkurve besteht darin, dass Sie sich mit Ihren Ger\u00e4ten und Ihrer Ausr\u00fcstung vertraut machen und verstehen, wie man sie richtig verwendet. Es mag banal erscheinen, aber die Kenntnis der Funktionsweise der Ger\u00e4te und Ausr\u00fcstung und die Anwendung guter Labortechnik sollten niemals als selbstverst\u00e4ndlich hingenommen werden. Machen Sie sich mit den Ihnen zur Verf\u00fcgung stehenden Ger\u00e4tschaften vertraut und \u00fcben Sie deren korrekte Handhabung, bis Sie die Technik beherrschen. Nur weil Sie ein \u00e4hnliches Ger\u00e4t schon einmal benutzt haben, hei\u00dft das nicht, dass das neue Ger\u00e4t genauso funktioniert.<\/p>\n\n\n\n
Automatische Pipetten sind ein gutes Beispiel daf\u00fcr: Sie erf\u00fcllen alle ihre Aufgabe, aber sie funktionieren nicht alle genau gleich, und die Erfahrungen mit einer Pipette lassen sich nicht immer auf eine andere \u00fcbertragen (Abbildung 1). Hier ein paar kleine, aber wesentliche Dinge, die Sie beachten sollten, wenn Sie Standards f\u00fcr Kalibrierkurven mithilfe von Pipetten herstellen.<\/p>\n\n\n\n
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Luftpolstersysteme gegen\u00fcber Direktverdr\u00e4ngungssystemen Luftpolsterpipetten sind empfindlich gegen\u00fcber dem Dampfdruck der Fl\u00fcssigkeit, die Sie messen. Sie werden in der Regel mit Wasser kalibriert, so dass Fl\u00fcssigkeiten mit h\u00f6herem oder niedrigerem Dampfdruck, deren Volumen mithilfe einer Luftpolsterpipette bestimmt wird, ein anderes Volumen besitzen, als die Pipette anzeigt. Wenn Sie korrekte und pr\u00e4zise Volumina von Fl\u00fcssigkeiten ben\u00f6tigen, die einen anderen Dampfdruck als Wasser aufweisen, sollten Sie eine Direktverdr\u00e4ngungspipette verwenden oder den Unterschied kompensieren, indem Sie Ihre Luftpolsterpipette gravimetrisch auf die korrekte Einstellung f\u00fcr die jeweilige Fl\u00fcssigkeit kalibrieren.<\/li>\n\n\n\n
Manuell bet\u00e4tigte Systeme gegen\u00fcber elektrisch bet\u00e4tigten Systemen Manuelle Pipetten erfordern Konsistenz seitens des Benutzers. Die Einstellung des Pipettenvolumens und die Gew\u00e4hrleistung identischer Aliquote ist entscheidend f\u00fcr konsistente Ergebnisse, da schon eine kleine Drehung oder ein Sto\u00df ausreichen kann, um die Volumeneinstellung zu ver\u00e4ndern. Sie m\u00fcssen au\u00dferdem darauf achten, dass Sie bei der Aufnahme und Abgabe von Fl\u00fcssigkeiten an den Widerstandspunkten den gleichen Druck auf den Kolben aus\u00fcben. Elektrische Pipetten zeigen bei der Handhabung eine geringere Tendenz \u201cabzudriften\u201d, aber sie bestimmen den Arbeitsrhythmus, und der Benutzer muss ihrem Tempo folgen.<\/li>\n<\/ul>\n\n\n
Abbildung 1:<\/strong>\u00a0Pipetten gibt es in vielen verschiedenen Ausf\u00fchrungen, z. B. mit manuellem oder elektrischem Antrieb und als Luftpolster- oder Direktverdr\u00e4ngungspipetten. Die Kolbengr\u00f6\u00dfen k\u00f6nnen sich \u00e4hnlich anf\u00fchlen; pr\u00fcfen Sie deshalb immer, dass Sie den korrekten Volumenbereich und die korrekte Spitzenart gew\u00e4hlt haben.<\/div>
Arten von Pipettenspitzen Die Anpassung der richtigen Spitze an die richtige Pipette ist \u00e4u\u00dferst wichtig. Nur weil eine Pipettenspitze auf eine bestimmte Pipette passt, bedeutet das nicht immer, dass es die richtige ist. Die Spitzen sind in der Regel farbcodiert, aber es lohnt sich trotzdem zu \u00fcberpr\u00fcfen, ob die Spitze zur Pipette passt.<\/li>\n\n\n\n
Kalibrierung Pipetten bleiben nicht unbegrenzt kalibriert. Stellen Sie sicher, dass sie regelm\u00e4\u00dfig professionell kalibriert werden, abh\u00e4ngig vom Bedarf oder den Anforderungen Ihres Labors und in \u00dcbereinstimmung mit dem Qualit\u00e4tsmanagementprogramm Ihrer Organisation. Es ist immer gute Praxis, die Kalibrierung Ihrer Pipette vor der Verwendung gravimetrisch mit Wasser zu \u00fcberpr\u00fcfen.<\/li>\n\n\n\n
Benetzung der Spitze Verdr\u00e4ngungspipettenspitzen neigen dazu, beim ersten Bef\u00fcllen Luftblasen zu enthalten. Durch mehrmaliges Bef\u00fcllen und Evakuieren vor der Verwendung k\u00f6nnen Blasen entfernt werden, die das abgegebene Volumen beeinflussen. Au\u00dferdem k\u00f6nnen Luftpolsterpipettenspitzen aufgrund eines Benetzungseffekts bei der Erstbef\u00fcllung ein etwas anderes Volumen aufweisen als bei nachfolgenden Messungen. Deshalb sollten Sie auf eine konsistente Technik achten.<\/li>\n\n\n\n
Pipettiertechnik In den meisten F\u00e4llen sollten die Pipettenspitzen knapp unter der Oberfl\u00e4che der Fl\u00fcssigkeit platziert werden. Ein zu tiefes Eintauchen der Pipettenspitze in die Fl\u00fcssigkeit kann dazu f\u00fchren, dass vor der Aufnahme zus\u00e4tzliche Fl\u00fcssigkeit in die Pipettenspitze gelangt und so das gemessene Volumen erh\u00f6ht. Au\u00dferdem sollte die Pipette senkrecht zur Fl\u00fcssigkeitsoberfl\u00e4che und nicht schr\u00e4g gehalten werden. In einer internen Studie haben wir korrekte und unsachgem\u00e4\u00dfe Pipettiertechniken verglichen, und die unsachgem\u00e4\u00dfe Technik f\u00fchrte zu einer fast neunmal h\u00f6heren Standardabweichung (Abbildung 2).<\/li>\n<\/ul>\n\n\n
Abbildung 2:<\/strong>\u00a0Minimieren Sie Fehler durch eine korrekte Pipettiertechnik: Halten Sie die Spitze immer senkrecht zur Fl\u00fcssigkeitsoberfl\u00e4che und knapp darunter. Schr\u00e4ghalten der Pipette oder ein zu tiefes Eintauchen in die Fl\u00fcssigkeit kann zu ungenauen Volumina f\u00fchren.<\/div>
Austausch der Pipettenspitze In den meisten F\u00e4llen sollten Pipettenspitzen nach dem Gebrauch ausgetauscht werden, da durch ihre Wiederverwendung Verunreinigungen in nachfolgende Messungen gelangen k\u00f6nnen. Wenn Sie denken, dass die Spitze m\u00f6glicherweise kontaminiert wurde, sollten Sie sie entsorgen.<\/li>\n\n\n\n
Volumenbereich Um Fehler zu reduzieren, ist das untere Ende des Volumenbereichs der Pipette m\u00f6glichst zu vermeiden. Au\u00dferdem sollen Sie eine Pipette verwenden, deren Bereich eher dem Volumen entspricht, das Sie abgeben m\u00f6chten. Wenn Sie z. B. 10 \u00b5L abgeben m\u00fcssen und die Wahl zwischen einer Pipette mit 1-10 \u00b5L und einer Pipette mit 10-100 \u00b5L haben, sollten Sie die Pipette mit 1-10 \u00b5L w\u00e4hlen, da der Fehler dieser Pipette f\u00fcr ein Aliquot von 10 \u00b5L normalerweise geringer ist als der Fehler der Pipette mit dem gr\u00f6\u00dferen Volumenbereich.<\/li>\n\n\n\n
Vermeiden Sie die Abgabe von sehr kleinen Volumina konzentrierter L\u00f6sungen Wenn Sie eine konzentrierte Stamml\u00f6sung haben, die Sie verd\u00fcnnen, um Ihre Kalibrierstandards herzustellen, und Sie sehr kleine Volumina verwenden m\u00fcssen, um die Kalibrierstandards mit den niedrigsten Konzentrationen herzustellen, sollten Sie in Erw\u00e4gung ziehen, eine intermedi\u00e4re Stamml\u00f6sung herzustellen, die es Ihnen erm\u00f6glicht, ein gr\u00f6\u00dferes Aliquot zu verd\u00fcnnen, um die Kalibrierstandards mit den niedrigsten Konzentrationen herzustellen.<\/li>\n<\/ul>\n\n\n\n
Welche anderen Laborger\u00e4te verwenden Sie routinem\u00e4\u00dfig bei der Herstellung von Standards f\u00fcr Kalibrierkurven? Vortex-Mixer und Ultraschallb\u00e4der werden h\u00e4ufig zum Mischen von Standards eingesetzt. Um Homogenit\u00e4t zu erzeugen, m\u00fcssen sie jedoch korrekt verwendet werden. Wenn Sie z. B. einen Vortex-Mixer verwenden, ist darauf zu achten, dass ausreichend Platz im Fl\u00e4schchen vorhanden ist, damit sich die L\u00f6sung effektiv mischen kann. Die Bildung eines kleinen Wasserwirbels in der Fl\u00fcssigkeit zeigt an, dass ausreichend Platz f\u00fcr eine gr\u00fcndliche Durchmischung vorhanden ist. Sch\u00fctteln oder Ultraschallbehandlung kann ebenfalls funktionieren, dauert aber etwas l\u00e4nger. Bei der Ultraschallbehandlung ist zu beachten, dass thermisch labile Verbindungen abgebaut werden k\u00f6nnen, da sich die L\u00f6sung w\u00e4hrend der Beschallung erhitzen kann. Bei Fragen zu Ger\u00e4ten und Ausr\u00fcstung sollten Sie Ihre Kollegen, Handb\u00fccher, Internetressourcen oder Ger\u00e4tehersteller konsultieren, um zu lernen, wie man die f\u00fcr die Herstellung von Standards f\u00fcr Kalibrierkurven ben\u00f6tigten Ger\u00e4te korrekt verwendet.<\/p>\n\n\n\n
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