{"id":48530,"date":"2023-12-06T00:00:00","date_gmt":"2023-12-06T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/discover.restek.com\/uncategorized\/breite-peaks-in-der-lc-durch-zu-hohes-systemvolumen\/"},"modified":"2026-01-22T22:06:43","modified_gmt":"2026-01-22T22:06:43","slug":"breite-peaks-in-der-lc-durch-zu-hohes-systemvolumen","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/blogs-de\/gnbl4719-de\/breite-peaks-in-der-lc-durch-zu-hohes-systemvolumen","title":{"rendered":"Breite Peaks in der LC durch zu hohes Systemvolumen"},"content":{"rendered":"\n<p>M\u00f6chte man die&nbsp;<strong>LC-Analytik beschleunigen<\/strong>&nbsp;oder&nbsp;<strong>L\u00f6semittel sparen<\/strong>, kann man dies unter anderem durch folgende&nbsp;<strong>\u00c4nderungen bei der S\u00e4ule<\/strong>&nbsp;machen:<\/p>\n\n\n\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>Einen kleineren Innendurchmesser w\u00e4hlen.\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>L\u00f6semittel-Ersparnis durch geringere Flussrate.<\/li>\n\n\n\n<li>Eine k\u00fcrzere S\u00e4ule mit kleineren Partikeln nehmen. (Der ID wird dabei meist auch reduziert.)<\/li>\n\n\n\n<li>Bessere Trennleistung, deshalb reicht meist die k\u00fcrzere S\u00e4ule.<\/li>\n\n\n\n<li>Schnellere Flussrate m\u00f6glich, Beschleunigung der Analytik.<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n\n\n\n<li>Eine Core-Shell S\u00e4ule nehmen.\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>Sch\u00e4rfere Peaks, bessere Trennleistung ohne Verringerung der Partikelgr\u00f6\u00dfe.<\/li>\n\n\n\n<li>Schnellere Flussrate m\u00f6glich, Beschleunigung der Analytik.<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n\n\n\n<p>In den F\u00e4llen, in denen sich dabei das&nbsp;<strong>Volumen der S\u00e4ule verringert<\/strong>, wird irgendwann das&nbsp;<strong>Systemvolumen wichtig<\/strong>&nbsp;(alles, was sich zwischen Injektor und S\u00e4ule befindet).<\/p>\n\n\n\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>Vielleicht hat der Ein oder Andere ja schon erlebt, dass die erhoffte Verbesserung der Peaksch\u00e4rfe und Trennleistung am \u00e4lteren HPLC-Ger\u00e4t ausgeblieben ist und die Peaks wider Erwarten breit (geblieben) sind?<\/li>\n\n\n\n<li>Dann k\u00f6nnte das am System(tot)volumen gelegen haben. Hier ein Beispiel, welchen Unterschied im Chromatogramm eine Ver\u00e4nderung des Systemvolumens vor der S\u00e4ule verursachen kann:<\/li>\n<\/ul>\n\n\n<div class=\"wp-block-image\">\n<figure class=\"aligncenter size-large\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"1024\" height=\"405\" src=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/\/blog-broad-peaks-in-lc-due-to-too-high-system-volume-01DE-1024x405.png\" alt=\"\" class=\"wp-image-12907\" title=\"-\" srcset=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/blog-broad-peaks-in-lc-due-to-too-high-system-volume-01DE-1024x405.png 1024w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/blog-broad-peaks-in-lc-due-to-too-high-system-volume-01DE-300x119.png 300w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/blog-broad-peaks-in-lc-due-to-too-high-system-volume-01DE-768x304.png 768w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/blog-broad-peaks-in-lc-due-to-too-high-system-volume-01DE-1536x608.png 1536w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/blog-broad-peaks-in-lc-due-to-too-high-system-volume-01DE.png 1971w\" sizes=\"auto, (max-width: 1024px) 100vw, 1024px\" \/><\/figure>\n<\/div>\n\n\n<div style=\"height:20px\" aria-hidden=\"true\" class=\"wp-block-spacer\"><\/div>\n\n\n\n<p><strong>Dies zeigt &#8230;<\/strong><\/p>\n\n\n\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>dass bei der Verringerung des S\u00e4ulenvolumens (grobe Faustregel: &lt; 100 mm L\u00e4nge, &lt; 3 mm Innendurchmesser) das Totvolumen der Anlage vor der S\u00e4ule eine Rolle spielen und Peaks breiter werden lassen kann als erwartet.\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>Der Effekt ist haupts\u00e4chlich bei isokratischer Arbeitsweise zu sehen, mit Gradientelution kann man einiges ausgleichen. Allerdings sind fr\u00fch eluierende Substanzen auch dort anf\u00e4llig f\u00fcr Peakverbreiterung.<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n\n\n\n<li>Es kann passieren, dass man mit einer \u00e4lteren Anlage, die noch nicht totvolumenoptimiert ist, gar nicht alle Vorteile einer modernen, kurzen, d\u00fcnnen S\u00e4ule mit kleinen Partikeln ausnutzen kann.\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>Hier kann man sich aber mit\u00a0<strong>5\u03bcm Core-Shell S\u00e4ulen<\/strong>\u00a0helfen, z.B. mit 3 mm ID und 100-150mm L\u00e4nge. Durch den speziellen Aufbau der Partikel erreicht man damit immerhin Trennleistungen wie mit einer vollpor\u00f6sen 3\u03bcm S\u00e4ule. Das ist meist schon eine sehr gute Verbesserung f\u00fcr die \u00e4lteren Ger\u00e4te (siehe Flyer Raptor 5\u03bcm).<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n\n\n\n<p><strong>Dies zeigt aber auch &#8230;<\/strong><\/p>\n\n\n\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>dass man beim Installieren von Kapillaren zwischen Injektor und S\u00e4ule vorsichtig sein sollte.\u00a0Erwischt man aus Versehen eine Kapillare mit zu dickem Innendurchmesser, kann dies eine Peakverbreiterung zur Folge haben. Im obigen Beispiel der Simulation des \u201eworst case\u201c wurde das h\u00f6here Systemvolumen n\u00e4mlich einfach durch Einbau eines zus\u00e4tzlichen St\u00fcckes Kapillare erreicht.\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>22 \u03bcL zus\u00e4tzliches Systemvolumen erreicht man z.B. durch Einbau von ca. 10 cm Tubing mit einem Innendurchmesser von 0.5 mm (0.02&#8243;) oder ca. 40 cm Tubing mit einem ID von 0.25 mm (0.01&#8243;).<\/li>\n\n\n\n<li>Der Innendurchmesser einer Kapillare hat einen st\u00e4rkeren Einfluss auf deren Volumen, da der Radius im Quadrat ins Volumen eingeht, die L\u00e4nge nur einfach (V = p r\u00b2 L).\u00a0D.h. die Verdopplung der L\u00e4nge einer Kapillare verdoppelt deren Volumen, die Verdopplung des Innendurchmesser vervierfacht es.<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n\n\n\n<li>Also sollte man den Innendurchmesser der Verbindungskapillaren m\u00f6glichst klein halten, aber auch nicht ZU klein, es muss f\u00fcr die jeweilige Anlage und Arbeitsweise noch praktikabel sein.\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>Je d\u00fcnner die Verbindungskapillaren sind, desto leichter verstopfen sie und desto mehr R\u00fcckdruck verursachen sie auch.\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>Wer erfolgreich an einem UHPLC-Ger\u00e4t arbeitet, ist d\u00fcnne Kapillaren und hohe Dr\u00fccke gewohnt, aber an einer klassischen HPLC-Anlage mit langen S\u00e4ulen mit 5\u03bcm Partikeln und 4.6 mm ID muss man im Normalfall einfach nicht so sauber bzw. partikelfrei arbeiten wie in der UHPLC. Dann kann es durchaus auch mal Probleme mit verstopften Kapillaren und zu hohem Druck geben.<\/li>\n\n\n\n<li>Am h\u00e4ufigsten werden in der LC Verbindungskapillaren mit ID 0.13 mm (0.005\u201c) oder 0.18 mm (0.007\u201c) verwendet, gefolgt (mit deutlichem Abstand) von 0.25 mm (0.01\u201c).<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n\n\n\n<div style=\"height:100px\" aria-hidden=\"true\" class=\"wp-block-spacer\"><\/div>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>In this post, we look at how to minimize broad peaks in your LC chromatogram while helping you speed up your analysis.<\/p>\n","protected":false},"author":58,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_acf_changed":false,"_kad_blocks_custom_css":"","_kad_blocks_head_custom_js":"","_kad_blocks_body_custom_js":"","_kad_blocks_footer_custom_js":"","_kadence_starter_templates_imported_post":false,"_kad_post_transparent":"","_kad_post_title":"","_kad_post_layout":"","_kad_post_sidebar_id":"","_kad_post_content_style":"","_kad_post_vertical_padding":"","_kad_post_feature":"","_kad_post_feature_position":"","_kad_post_header":false,"_kad_post_footer":false,"footnotes":""},"categories":[792],"tags":[],"industries-application":[],"post-badge":[],"resource-type":[],"product-library":[],"resource-technique":[2299],"ppma_author":[613],"class_list":["post-48530","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-blogs-de","resource-technique-liquid-chromatography"],"acf":[],"taxonomy_info":{"category":[{"value":792,"label":"Blogs"}],"resource-technique":[{"value":2299,"label":"Liquid Chromatography"}]},"featured_image_src_large":false,"author_info":{"display_name":"Ute Beyer","author_link":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/author\/ute-beyer\/"},"comment_info":0,"category_info":[{"term_id":792,"name":"Blogs","slug":"blogs-de","term_group":0,"term_taxonomy_id":792,"taxonomy":"category","description":"","parent":0,"count":438,"filter":"raw","cat_ID":792,"category_count":438,"category_description":"","cat_name":"Blogs","category_nicename":"blogs-de","category_parent":0}],"tag_info":false,"authors":[{"term_id":613,"user_id":58,"is_guest":0,"slug":"ute-beyer","display_name":"Ute Beyer","avatar_url":"https:\/\/secure.gravatar.com\/avatar\/?s=96&d=mm&r=g","0":null,"1":"","2":"","3":"","4":"","5":"","6":"","7":"","8":""}],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/48530","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/users\/58"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=48530"}],"version-history":[{"count":7,"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/48530\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":64805,"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/48530\/revisions\/64805"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=48530"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=48530"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=48530"},{"taxonomy":"industries-application","embeddable":true,"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/industries-application?post=48530"},{"taxonomy":"post-badge","embeddable":true,"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/post-badge?post=48530"},{"taxonomy":"resource-type","embeddable":true,"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/resource-type?post=48530"},{"taxonomy":"product-library","embeddable":true,"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/product-library?post=48530"},{"taxonomy":"resource-technique","embeddable":true,"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/resource-technique?post=48530"},{"taxonomy":"author","embeddable":true,"href":"https:\/\/discover.restek.com\/de\/wp-json\/wp\/v2\/ppma_author?post=48530"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}