Als wir 2014 unsere Raptor ARC-18 Core-Shell LC-S\u00e4ulen einf\u00fchrten, konnten wir direkt das dringende Problem eines Kunden l\u00f6sen. Wir wollen Ihnen mit diesem Beispiel zeigen, wie leicht Sie mit 2,7 \u00b5m und 5 \u00b5m Raptor Core-Shell-Partikeln HPLC- und UHPLC-Methoden verbessern k\u00f6nnen.<\/p>\n\n\n\n
Unser Kunde (SGS Institut Fresenius GmbH, Taunusstein, Deutschland) analysierte 130 Pestizide (siehe unten) in verschiedenen W\u00e4ssern (Mineral- und Trinkwasser, Brunnen- und Oberfl\u00e4chenwasser, Roh- und Prozesswasser, Abwasser) durch direkte Injektion von 50-100 \u00b5L Probe auf HPLC-MS\/MS (bis max. 400 bar) und UHPLC-MS\/MS (bis max. 600 bar). Beide Methoden wurden von vollpor\u00f6sen Materialien auf einen 2.7 \u00b5m CoreShell Partikel umgestellt und so deutlich optimiert (siehe Tabelle unten). Die Empfindlichkeit der HPLC-Methode (bisher auf einer 5 \u00b5m vollpor\u00f6sen Partikeln) konnte erh\u00f6ht und die Laufzeit fast halbiert werden und das unter Beibehaltung des Drucks. Die UHPLC-Methode (bisher auf einer vollpor\u00f6sen 1,7-\u00b5m-S\u00e4ule) wurde robuster, die Laufzeit konnte fast halbiert werden, wobei die gleiche Trennleistung bei niedrigeren Dr\u00fccken erzielt wurde.<\/p>\n\n\n\n * Puffer = Ammoniumformiate; ** Gradient Details auf Nachfrage<\/p>\n\n\n\n Bei den bisherigen Methoden konnte bei beiden Ger\u00e4tetypen nur ein 0,2 \u00b5m Vors\u00e4ulenfilter zum Schutz vor Partikeln verwendet werden. Der Einsatz einer Vors\u00e4ule zum besseren Schutz bei Abwasserproben war nicht m\u00f6glich, da die Dr\u00fccke bereits nahe an den Grenzen der Systeme lagen (400 und 600 bar). Die Raptor-S\u00e4ule hingegen konnte aufgrund der niedrigeren Dr\u00fccke, die im Rahmen der endg\u00fcltigen Methode erreicht wurden, mit einer entsprechenden Schutzs\u00e4ule verwendet werden. \u00dcbrigens k\u00f6nnen Raptor 2,7 \u00b5m S\u00e4ulen bei Bedarf auch bis 600 bar im Dauerbetrieb eingesetzt werden.<\/p>\n\n\n\n UHPLC mit Partikeln < 2 \u00b5m kann sicherlich die ultimative L\u00f6sung sein, aber der Erfolg h\u00e4ngt stark von der Sauberkeit der injizierten Proben oder Extrakte ab. Je kleiner der Partikeldurchmesser ist, desto kleiner sind die Zwischenr\u00e4ume in der S\u00e4ule und desto h\u00f6her ist das Risiko einer Verstopfung. Die Arbeit mit < 2 \u00b5m gro\u00dfen Partikeln kann in der Routineanalyse mit unterschiedlichen Probentypen eine Herausforderung darstellen. Oft ist eine aufwendige Probenvorbereitung erforderlich, oder die S\u00e4ule muss h\u00e4ufig ausgetauscht werden.<\/p>\n\n\n\n Aus diesem Grund sind Raptor 2,7 \u00b5m Core-Shell-S\u00e4ulen eine sehr gute Alternative zu < 2 \u00b5m vollpor\u00f6sen Partikeln: Druck und Robustheit sind vergleichbar mit 3 \u00b5m S\u00e4ulen, aber durch das spezielle Partikeldesign ist die Trennleistung vergleichbar mit < 2 \u00b5m vollpor\u00f6sen Partikeln.<\/p>\n\n\n\n Besonders wichtig bei solchen Multimethoden ist die ausgewogene Verteilung der Analyten \u00fcber die gesamte Laufzeit, um eine optimale Empfindlichkeit in der MS zu erreichen. Wenn zu viele Verbindungen gleichzeitig eluieren, wird die Probenahmezeit pro Analyt im MRM-Modus zu kurz, was die Empfindlichkeit verringert. Das \u201eausgewogene Retentionsprofil\u201c der Raptor ARC-18-Phase erf\u00fcllt diese Anforderung sehr gut (Abbildung 1).<\/p>\n\n\n <\/td> HPLC<\/strong>-MS\/MS mit vollpor\u00f6ser <\/strong>S\u00e4ule<\/td> HPLC<\/strong>-MS\/MS mit Raptor ARC-18 Core-Shell <\/strong>S\u00e4ule<\/td> UHPLC<\/strong>-MS\/MS mit vollpor\u00f6ser <\/strong>S\u00e4ule<\/td> UHPLC<\/strong>\/MS mit Raptor ARC-18 Core-Shell <\/strong>S\u00e4ule<\/td><\/tr> S\u00e4ulenl\u00e4nge [mm]<\/td> 150<\/td> 100<\/td> 100<\/td> 100<\/td><\/tr> ID [mm]<\/td> 2.1<\/td> 2.1<\/td> 2.1<\/td> 2.1<\/td><\/tr> Partikelgr\u00f6\u00dfe [\u03bcm]<\/strong><\/td> 5<\/strong><\/td> 2.7<\/strong><\/td> 1.7<\/strong><\/td> 2.7<\/strong><\/td><\/tr> Temperatur [\u00b0C]<\/td> 25<\/td> 25<\/td> 45<\/td> 30<\/td><\/tr> Mobile Phase A<\/td> A: 90% Wasser,
10% Methanol,
5mM Puffer *<\/td>A: 90% Wasser,
10% Methanol,
5mM Puffer *<\/td>A: 90% Wasser,
10% Methanol,
10mM Puffer *<\/td>A: 90% Wasser,
10% Methanol,
10mM Puffer *<\/td><\/tr>Mobile Phase B<\/td> B: 100% Methanol,
5mM Puffer *<\/td>B: 100% Methanol,
5mM Puffer *<\/td>B: 100% Methanol,
10mM Puffer *<\/td>B: 100% Methanol,
10mM Puffer *<\/td><\/tr>Gradient **<\/td> 0 – 89% B<\/td> 0 – 89% B<\/td> 27 – 100% B<\/td> 15 – 100% B<\/td><\/tr> Fluss [mL\/min]<\/strong><\/td> 0.3<\/strong><\/td> 0.3<\/strong><\/td> 0.25<\/strong><\/td> 0.4<\/strong><\/td><\/tr> R\u00fcckdruck [bar]<\/strong><\/td> 150 – 350<\/strong><\/td> 150 – 300<\/strong><\/td> 450 – 570<\/strong><\/td> 250 – 350<\/strong><\/td><\/tr> Injektionsvolumen [\u03bcL]<\/td> 50<\/td> 50<\/td> 100<\/td> 100<\/td><\/tr> Analysezeit (bis zum Ende der Trennung) [min]<\/td> 11.4<\/td> 3.3<\/td> 13.5<\/td> 7.8<\/td><\/tr> Gesamtzykluszeit (bis zur n\u00e4chsten Injektion) [min]<\/strong><\/td> 19.5<\/strong><\/td> 10<\/strong><\/td> 19.5<\/strong><\/td> 10.5<\/strong><\/td><\/tr> Vorteile der Nutzung einer Raptor ARC-18 Core-Shell S\u00e4ule<\/strong><\/span><\/td> <\/td> Schmalere Peaks, Bessere Empfindlichkeit, K\u00fcrzere Analysezeit<\/strong><\/span><\/td> <\/td> Gleiche Trenneffizienz, aber l\u00e4ngere Lebensdauer der S\u00e4ule, weniger R\u00fcckdruck, K\u00fcrzere Analysezeit<\/strong><\/span><\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n