{"id":43595,"date":"2021-06-24T14:30:00","date_gmt":"2021-06-24T14:30:00","guid":{"rendered":"https:\/\/discover.restek.com\/uncategorized\/developpement-de-methodes-ilsp-in-line-sample-preparation\/"},"modified":"2026-01-28T19:23:36","modified_gmt":"2026-01-28T19:23:36","slug":"developpement-de-methodes-ilsp-in-line-sample-preparation","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/discover.restek.com\/fr\/articles-fr\/fsar3550-fr\/developpement-de-methodes-ilsp-in-line-sample-preparation","title":{"rendered":"D\u00e9veloppement de M\u00e9thodes ILSP (In-Line Sample Preparation)"},"content":{"rendered":"\n<p>La pr\u00e9paration d\u2019\u00e9chantillons en ligne ILSP est destin\u00e9e \u00e0 remplacer les proc\u00e9dures manuelles chronophages telles que les m\u00e9thodes QuEChERS ou SPE, en permettant une purification automatis\u00e9e des \u00e9chantillons. Une fois install\u00e9e sur un instrument configur\u00e9 pour des applications LC bidimensionnelles, une cartouche Restek Revive ISLP va retenir les compos\u00e9s interf\u00e9rents provenant de la matrice. Ces compos\u00e9s sont ensuite \u00e9limin\u00e9s par un rin\u00e7age (&#8220;backflush&#8221;) de la cartouche \u00e0 l\u2019aide d\u2019un solvant de rin\u00e7age. Le rin\u00e7age a lieu pendant l\u2019analyse LC-MS\/MS afin que la cartouche soit pr\u00eate \u00e0 purifier un nouvel \u00e9chantillon avant la prochaine injection, faisant de la proc\u00e9dure ILSP une proc\u00e9dure tr\u00e8s efficace pouvant augmenter consid\u00e9rablement le nombre d\u2019\u00e9chantillons analys\u00e9s et le d\u00e9bit d\u2019analyses. La purification Revive ILSP est tr\u00e8s efficace et peut \u00eatre associ\u00e9e \u00e0 une simple extraction solide-liquide afin d\u2019\u00e9conomiser du temps et de l\u2019argent. Cet article d\u00e9crit en d\u00e9tails comment d\u00e9velopper des m\u00e9thodes ILSP pour que les laboratoires puissent profiter des avantages de cette technique tr\u00e8s puissante.<\/p>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Configuration instrumentale&nbsp;requise<\/h2>\n\n\n\n<p>Pour pouvoir utiliser l\u2019approche ILSP, vous aurez besoin d\u2019une cha\u00eene HPLC usuelle, \u00e9quip\u00e9e d\u2019une pompe binaire ou quaternaire, d\u2019un passeur d\u2019\u00e9chantillons capable de faire des lavages internes de l\u2019aiguille, d\u2019un compartiment colonne et d\u2019un d\u00e9tecteur. Comme le montre la Figure 1, pour \u00eatre compatible, un instrument doit \u00e9galement inclure :<\/p>\n\n\n\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>Une pompe isocratique ind\u00e9pendante qui servira \u00e0 rincer la cartouche ILSP avec le solvant de rin\u00e7age.<\/li>\n\n\n\n<li>Une vanne de &#8220;switch&#8221; haute-pression \u00e0 6 voies qui contr\u00f4lera le d\u00e9bit allant vers la cartouche ILSP pendant l\u2019\u00e9tape de rin\u00e7age.<\/li>\n<\/ul>\n\n\n\n<p>N\u2019h\u00e9sitez pas \u00e0 contacter votre fournisseur d\u2019instruments LC si vous avez besoin d\u2019aide pour configurer votre instrument.ce setting up your instrument, please consult your instrument manufacturer.<\/p>\n\n\n<div class=\"wp-block-custom-chromatogram-article-top\"><div class=\"chromatogram-article-placeholder\"><div class=\"figure-heading\"><strong>Figure 1:\u00a0<\/strong>Configuration instrumentale ISLP-LC-MS\/M<\/div><div class='chromatogram-article-inner-full'><div class=\"chromatogram-article-inner\">\n<div class=\"wp-block-image\">\n<figure class=\"aligncenter size-large\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"1024\" height=\"626\" src=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/\/figure-article-FSAR3550-01-1024x626.jpg\" alt=\"\" class=\"wp-image-20080\" title=\"-\" srcset=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAR3550-01-1024x626.jpg 1024w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAR3550-01-300x183.jpg 300w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAR3550-01-768x469.jpg 768w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAR3550-01-1536x939.jpg 1536w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAR3550-01.jpg 1800w\" sizes=\"auto, (max-width: 1024px) 100vw, 1024px\" \/><\/figure>\n<\/div>\n<\/div><\/div><\/div>\n\n\n<div style=\"height:20px\" aria-hidden=\"true\" class=\"wp-block-spacer\"><\/div>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">D\u00e9veloppement de m\u00e9thodes<\/h2>\n\n\n\n<p>Comme pour toute autre technique de pr\u00e9paration d\u2019\u00e9chantillons, il est n\u00e9cessaire d\u2019\u00e9valuer les conditions ILSP pour chaque nouvelle liste d\u2019analytes et\/ou pour chaque nouvelle matrice. Utilisez l\u2019approche suivante d'&#8221;analyte pass-through&#8221; pour le d\u00e9veloppement de votre m\u00e9thode de pr\u00e9paration d\u2019\u00e9chantillons en ligne afin de d\u00e9terminer les conditions optimales de la m\u00e9thode ILSP, sp\u00e9cifiques \u00e0 vos \u00e9chantillons et matrices.<\/p>\n\n\n\n<p>Dans cette approche &#8220;analyte pass-trough&#8221;, une cartouche Revive ILSP est utilis\u00e9e pour \u00e9luer les analytes d\u2019int\u00e9r\u00eat tout en retenant les compos\u00e9s interf\u00e9rents provenant de la matrice. Une fois que les analytes d\u2019int\u00e9r\u00eat sont pass\u00e9s \u00e0 travers la cartouche ILSP pour ensuite \u00eatre s\u00e9par\u00e9s dans la colonne analytique, la vanne de &#8220;switch&#8221; haute-pression \u00e0 6 voies change de position, et les compos\u00e9s de la matrice qui \u00e9taient retenus sur la cartouche ILSP sont alors envoy\u00e9s vers la poubelle \u00e0 l\u2019aide du solvant de rin\u00e7age (par la pompe ind\u00e9pendante). Les \u00e9tapes suivantes permettent de d\u00e9finir les temps de &#8220;switch&#8221; de la vanne et les conditions du solvant de rin\u00e7age appropri\u00e9s pour une m\u00e9thode donn\u00e9e.<\/p>\n\n\n\n<p><em>NOTE : il est suppos\u00e9 ici qu\u2019une m\u00e9thode chromatographique appropri\u00e9e \u00e0 la matrice et aux analytes d\u2019int\u00e9r\u00eat a d\u00e9j\u00e0 \u00e9t\u00e9 d\u00e9velopp\u00e9e. Si la m\u00e9thode analytique n\u2019existe pas, la s\u00e9paration analytique doit \u00eatre \u00e9tablie avant de d\u00e9velopper la m\u00e9thode ILSP.<\/em><\/p>\n\n\n\n<h3 class=\"wp-block-heading\"><em>\u00c9tape 1 : Chargement de la colonne \u2013 D\u00e9termination de la r\u00e9tention des analytes sur la cartouche ILSP<\/em><\/h3>\n\n\n\n<p>Cette \u00e9tape a pour objectif de contr\u00f4ler le temps n\u00e9cessaire aux analytes d\u2019int\u00e9r\u00eat pour \u00e9luer de la cartouche Revive ILSP, ce qui va d\u00e9terminer le temps allou\u00e9 \u00e0 un \u00e9chantillon pour passer \u00e0 travers la cartouche ILSP et \u00eatre charg\u00e9 sur la colonne analytique avant le premier \u00e9v\u00e8nement de &#8220;switch&#8221; de la vanne.<\/p>\n\n\n\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>Configurer la vanne de &#8220;switch&#8221; 6 voies comme illustr\u00e9 dans la Figure 2 avec une union \u00e0 la place de la colonne analytique.<\/li>\n\n\n\n<li>Injecter un standard en solvant (sans matrice) contenant les analytes d\u2019int\u00e9r\u00eat sur la cartouche ILSP en utilisant les phases mobiles et les conditions de gradient de la m\u00e9thode analytique existante. Ne pas oublier d\u2019ajuster les fen\u00eatres MRM si n\u00e9cessaire.<\/li>\n\n\n\n<li>Localiser sur le chromatogramme l\u2019analyte d\u2019int\u00e9r\u00eat \u00e9luant en dernier. Le temps auquel cet analyte est compl\u00e8tement \u00e9lu\u00e9 d\u00e9finit alors le temps le plus pr\u00e9coce auquel la vanne peut \u00eatre programm\u00e9e pour passer de la position de chargement de la colonne analytique \u00e0 la position de rin\u00e7age de la cartouche ILSP (d\u00e9crite dans la Figure 3). Pour tenir compte des possibles l\u00e9g\u00e8res variations de la r\u00e9tention de la colonne d\u2019un lot \u00e0 l\u2019autre, ajouter 10 \u00e0 20 secondes \u00e0 ce temps d\u00e9termin\u00e9 pour \u00e9luer compl\u00e8tement le dernier analyte d\u2019int\u00e9r\u00eat.<\/li>\n<\/ul>\n\n\n<div class=\"wp-block-custom-chromatogram-article-top\"><div class=\"chromatogram-article-placeholder\"><div class=\"figure-heading\"><strong>Figure 2:\u00a0<\/strong>Position de la vanne et configuration instrumentale pour l\u2019\u00e9tape 1<\/div><div class='chromatogram-article-inner-full'><div class=\"chromatogram-article-inner\">\n<div class=\"wp-block-image\">\n<figure class=\"aligncenter size-large\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"1024\" height=\"466\" src=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/\/figure-article-FSAR3550-02-1024x466.jpg\" alt=\"\" class=\"wp-image-20092\" title=\"-\" srcset=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAR3550-02-1024x466.jpg 1024w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAR3550-02-300x137.jpg 300w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAR3550-02-768x350.jpg 768w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAR3550-02-1536x700.jpg 1536w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAR3550-02.jpg 1800w\" sizes=\"auto, (max-width: 1024px) 100vw, 1024px\" \/><\/figure>\n<\/div>\n<\/div><\/div><\/div>\n\n\n<div style=\"height:20px\" aria-hidden=\"true\" class=\"wp-block-spacer\"><\/div>\n\n\n\n<h3 class=\"wp-block-heading\"><em><em>\u00c9tape 2 : Rin\u00e7age de la cartouche ILSP \u2013 D\u00e9termination de la composition et des conditions du solvant de rin\u00e7age<\/em><\/em><\/h3>\n\n\n\n<p>La deuxi\u00e8me \u00e9tape du d\u00e9veloppement d\u2019une m\u00e9thode ILSP consiste \u00e0 d\u00e9terminer la composition la plus appropri\u00e9e du solvant de rin\u00e7age ainsi que le d\u00e9bit optimum et la synchronisation de la vanne. Cela permet de s\u2019assurer que les compos\u00e9s interf\u00e9rents provenant de la matrice retenus lors d\u2019une injection sont bien \u00e9limin\u00e9s de la cartouche Revive ILSP avant l\u2019injection suivante.<\/p>\n\n\n\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>Pr\u00e9parer un solvant de rin\u00e7age initial compos\u00e9 de formiate d\u2019ammonium 2 mM et 0.1 % d\u2019acide formique dans le m\u00e9thanol. Cette composition conviendra \u00e0 de nombreuses applications, mais comme indiqu\u00e9 ci-dessous, d\u2019autres solvants et compositions peuvent \u00eatre \u00e9valu\u00e9s en fonction des r\u00e9sultats initiaux.<\/li>\n\n\n\n<li>Pour plus de facilit\u00e9, remplacer la phase mobile B par le solvant de rin\u00e7age choisi (Figure 3).<\/li>\n\n\n\n<li>Utiliser un d\u00e9bit de 1 ml\/min et injecter sur la cartouche ISLP un blanc de matrice (sans analytes d\u2019int\u00e9r\u00eat pr\u00e9sents).<\/li>\n\n\n\n<li>Suivre la pr\u00e9sence de la matrice en mode &#8220;full scan&#8221;, ou en mode SIM si des ions sp\u00e9cifiques \u00e0 la matrice sont connus.<\/li>\n\n\n\n<li>Noter le temps n\u00e9cessaire pour que le chromatogramme TIC retourne \u00e0 la ligne de base, ce qui indique que la matrice a \u00e9t\u00e9 compl\u00e8tement \u00e9limin\u00e9e de la cartouche ILSP.<\/li>\n\n\n\n<li>Ce temps est le temps n\u00e9cessaire pour \u00e9liminer compl\u00e8tement de la cartouche ILSP les compos\u00e9s interf\u00e9rents provenant de la matrice qui \u00e9taient retenus, et ce temps doit \u00eatre compar\u00e9 au temps de cycle total de la m\u00e9thode analytique.\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>Si la matrice est compl\u00e8tement \u00e9limin\u00e9e de la cartouche ILSP avant la fin de l\u2019analyse chromatographique (Figure 4), la m\u00e9thode de rin\u00e7age n\u2019a probablement pas besoin d\u2019une optimisation suppl\u00e9mentaire et peut donc \u00eatre programm\u00e9e dans la m\u00e9thode globale, en utilisant une deuxi\u00e8me pompe ind\u00e9pendante pour contr\u00f4ler le d\u00e9bit du solvant de rin\u00e7age (Pompe C) appliqu\u00e9 sur la cartouche ILSP.<\/li>\n\n\n\n<li>Si le temps n\u00e9cessaire \u00e0 l\u2019\u00e9limination compl\u00e8te de la matrice de la cartouche ILSP est plus long que le temps de cycle de la m\u00e9thode analytique, alors la composition du solvant de rin\u00e7age et\/ou le d\u00e9bit doivent \u00eatre optimis\u00e9s pour am\u00e9liorer l\u2019efficacit\u00e9 du rin\u00e7age.\n<ul class=\"wp-block-list\">\n<li>Pour de meilleures performances, il est recommand\u00e9 de maintenir les concentrations de tampon entre 2 et 10 mM et les concentrations d\u2019acide entre 0.1 et 0.5 %. Des pr\u00e9cautions doivent \u00e9galement \u00eatre prises pour \u00e9viter la pr\u00e9cipitation du tampon lors de la r\u00e9\u00e9quilibration de la cartouche ILSP dans les conditions initiales de phase mobile.<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n<\/li>\n<\/ul>\n\n\n\n<p><em>NOTE : Ne pas tamponner le solvant de rin\u00e7age en dehors de la plage de pH 2\u20138.<\/em><\/p>\n\n\n<div class=\"wp-block-custom-chromatogram-article-top\"><div class=\"chromatogram-article-placeholder\"><div class=\"figure-heading\"><strong>Figure 3 :\u00a0<\/strong>Position de la vanne et configuration instrumentale pour l\u2019\u00e9tape 2<\/div><div class='chromatogram-article-inner-full'><div class=\"chromatogram-article-inner\">\n<div class=\"wp-block-image\">\n<figure class=\"aligncenter\"><img decoding=\"async\" src=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAR3550-03.jpg\" alt=\"decorative\" title=\"-\"><\/figure>\n<\/div>\n<\/div><\/div><\/div>\n\n<div class=\"wp-block-custom-chromatogram-article-top\"><div class=\"chromatogram-article-placeholder\"><div class=\"figure-heading\"><strong>Figure 4 :\u00a0<\/strong>Chronologie des \u00e9v\u00e8nements d\u2019un d\u00e9veloppement d\u2019une m\u00e9thode ILSP<\/div><div class='chromatogram-article-inner-full'><div class=\"chromatogram-article-inner\">\n<div class=\"wp-block-image\">\n<figure class=\"aligncenter\"><img decoding=\"async\" src=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAR3550-04.jpg\" alt=\"decorative\" title=\"-\"><\/figure>\n<\/div>\n<\/div><\/div><\/div>\n\n\n<div style=\"height:20px\" aria-hidden=\"true\" class=\"wp-block-spacer\"><\/div>\n\n\n\n<h3 class=\"wp-block-heading\"><em>\u00c9tape 3 : Mises \u00e0 jour de la m\u00e9thode \u2013 Ajout des \u00e9v\u00e8nements ILSP \u00e0 une m\u00e9thode analytique existante<\/em><\/h3>\n\n\n\n<p>Cette derni\u00e8re \u00e9tape a pour but d&#8217;utiliser les informations recueillies lors des \u00e9tapes 1 et 2 pour ajouter ces \u00e9v\u00e8nements \u00e0 la m\u00e9thode analytique existante aux temps appropri\u00e9s. La Figure 4 montre un exemple des endroits o\u00f9 de nouveaux \u00e9v\u00e9nements seraient ajout\u00e9s dans une m\u00e9thode HPLC en gradient typique. Un exemple de d\u00e9veloppement d\u2019une m\u00e9thode ILSP pour une m\u00e9thode existante d\u2019analyse de pesticides dans les aliments est pr\u00e9sent\u00e9 dans le Tableau I.<\/p>\n\n\n\n<h5 class=\"wp-block-heading\"><strong>Tableau I :&nbsp;<\/strong>Exemple de d\u00e9veloppement d\u2019une m\u00e9thode Revive ILSP pour une m\u00e9thode d\u2019analyse de pesticides dans les aliments<\/h5>\n\n\n\n<figure class=\"wp-block-table\"><table class=\"has-fixed-layout\"><tbody><tr><td colspan=\"3\"><strong>Tableau des \u00e9v\u00e8nements chromatographiques originaux :<\/strong><\/td><\/tr><tr><td><strong>Temps (min)<\/strong><\/td><td><strong>% Phase Mobile B<\/strong><\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><tr><td>0<\/td><td>5<\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><tr><td>2<\/td><td>60<\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><tr><td>4<\/td><td>75<\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><tr><td>6<\/td><td>100<\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><tr><td>7<\/td><td>100<\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><tr><td>7.01<\/td><td>5<\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><tr><td>9<\/td><td>Stop<\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>Valeurs d\u00e9termin\u00e9es lors du d\u00e9veloppement de la m\u00e9thode ILSP :<\/strong><\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>Etape 1 :<\/strong><\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>Temps pour \u00e9luer le dernier analyte d\u2019int\u00e9r\u00eat hors de la cartouche ILSP = 4.6 min<\/strong><\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>Temps &#8220;tampon&#8221; ajout\u00e9 pour s\u2019assurer du transfert complet du dernier analyte d\u2019int\u00e9r\u00eat = 0.3 min<\/strong><\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>Temps de &#8220;switch&#8221; de la vanne en position de rin\u00e7age ILSP (somme des temps pr\u00e9c\u00e9dents) = 4.9 min<\/strong><\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>Etape 2 :<\/strong><\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>Composition du solvant de rin\u00e7age = formiate d\u2019ammonium 2 mM &amp; 0.1% d\u2019acide formique dans le m\u00e9thanol<\/strong><\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>D\u00e9bit du solvant de rin\u00e7age = 1 ml\/min<\/strong><\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>Temps pour \u00e9liminer de la cartouche ILSP les compos\u00e9s interf\u00e9rents provenant de la matrice = 0.6 min<\/strong><\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>Temps \u201ctampon\u201d pour tenir compte des variations de gravit\u00e9 des compos\u00e9s de la matrice retenus = 0.4 min<\/strong><\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>Temps total pour rincer la cartouche ILSP = 1.0 min<\/strong><\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>Remarque : Aucune modification du d\u00e9bit et de la composition du solvant de rin\u00e7age n\u2019est n\u00e9cessaire.<\/strong><\/td><\/tr><tr><td colspan=\"3\"><strong>Tableau des \u00e9v\u00e8nements chromatographiques mis \u00e0 jour :<\/strong><\/td><\/tr><tr><td><strong>Temps (min)<\/strong><\/td><td><strong>% Phase Mobile B<\/strong><\/td><td><strong>\u00c9v\u00e9nement<\/strong><\/td><\/tr><tr><td>0<\/td><td>5<\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><tr><td>2<\/td><td>60<\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><tr><td>4<\/td><td>75<\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><tr><td>4.9<\/td><td>&#8211;<\/td><td>&#8220;Switch&#8221; de la vanne en position de rin\u00e7age ILSP (voir Figure 4).<\/td><\/tr><tr><td>4.92<\/td><td>&#8211;<\/td><td>D\u00e9finir du d\u00e9bit du solvant de rin\u00e7age ILSP \u00e0 1 ml\/min (pompe C).<\/td><\/tr><tr><td>5.92<\/td><td>&#8211;<\/td><td>Stopper le d\u00e9bit du solvant de rin\u00e7age pour \u00e9conomiser ce dernier (pompe C).<\/td><\/tr><tr><td>6<\/td><td>100<\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><tr><td>7<\/td><td>100<\/td><td>Tous les compos\u00e9s ont \u00e9t\u00e9 \u00e9lu\u00e9s de la colonne analytique \u00e0 ce stade.<\/td><\/tr><tr><td>7.01<\/td><td>5<\/td><td>Retour aux conditions initiales de phase mobile pour r\u00e9\u00e9quilibrer la colonne.<\/td><\/tr><tr><td>7.05<\/td><td>&#8211;<\/td><td>\u201cSwitch\u201d de la vanne en position de chargement de la colonne analytique pour permettre \u00e0 la cartouche ILSP de se r\u00e9\u00e9quilibrer.*<\/td><\/tr><tr><td>9<\/td><td>Stop<\/td><td>&nbsp;<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n<p>*Il est recommand\u00e9 d\u2019attendre jusqu\u2019\u00e0 ce point pour le &#8220;switch&#8221; de la vanne afin d\u2019\u00e9viter toute perturbation possible de la ligne de base (due \u00e0 ce &#8220;switch&#8221; de la vanne) pendant la s\u00e9paration analytique.<\/p>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Maintenance et &#8220;troubleshooting&#8221;<\/h2>\n\n\n\n<p>La plupart des probl\u00e8mes rencontr\u00e9s avec la pr\u00e9paration d\u2019\u00e9chantillons en ligne peuvent \u00eatre \u00e9vit\u00e9s ou rectifi\u00e9s avec des connaissances et informations de base sur la matrice et la m\u00e9thode. Dans un premier temps, les ions sp\u00e9cifiques \u00e0 la matrice doivent \u00eatre identifi\u00e9s en comparant les donn\u00e9es de &#8220;scan&#8221; d\u2019un blanc de matrice extrait et d\u2019un blanc de solvant d\u2019extraction. Une fois que les ions sp\u00e9cifiques \u00e0 la matrice ont \u00e9t\u00e9 d\u00e9termin\u00e9s, ils peuvent \u00eatre entr\u00e9s dans la m\u00e9thode analytique et suivis en mode SIM. Cette \u00e9tape fournit un outil de diagnostic pr\u00e9cieux qui peut \u00eatre utilis\u00e9 lorsque l\u2019on rencontre des probl\u00e8mes de performances pour d\u00e9terminer si ceux-ci sont li\u00e9s \u00e0 la pr\u00e9sence de contaminants persistants provenant de la matrice. Des solutions aux probl\u00e8mes les plus couramment rencontr\u00e9s sont pr\u00e9sent\u00e9es dans le Tableau II.<\/p>\n\n\n\n<p>En utilisant cette approche pour le d\u00e9veloppement d\u2019une m\u00e9thode ILSP et en sachant comment r\u00e9soudre les probl\u00e8mes pouvant survenir, les laboratoires peuvent inclure l\u2019ILSP \u00e0 leurs m\u00e9thodes existantes en toute confiance et augmenter consid\u00e9rablement leur nombre d\u2019\u00e9chantillons analys\u00e9s.<\/p>\n\n\n\n<h5 class=\"wp-block-heading\"><strong>Tableau II :&nbsp;<\/strong>Solutions pour le \u201cTroubleshooting\u201d ILSP<\/h5>\n\n\n\n<figure class=\"wp-block-table\"><table class=\"has-fixed-layout\"><tbody><tr><td><strong>Probl\u00e8me<\/strong><\/td><td><strong>Cause possible<\/strong><\/td><td><strong>Solution<\/strong><\/td><\/tr><tr><td><strong>Les pics \u00e9luant en dernier sont manquants<\/strong><\/td><td>Le temps d\u00e9fini pour l\u2019\u00e9v\u00e8nement de chargement de la colonne est incorrect<\/td><td>Augmenter le temps n\u00e9cessaire au chargement de la colonne<\/td><\/tr><tr><td><strong>Certains pics sont absents<\/strong><\/td><td>Fen\u00eatres MRM mal d\u00e9finies<\/td><td>L\u2019ajout de la cartouche ILSP peut entra\u00eener une l\u00e9g\u00e8re modification des temps de r\u00e9tention n\u00e9cessitant la mise \u00e0 jour des fen\u00eatres MRM<\/td><\/tr><tr><td rowspan=\"2\"><strong>Pics larges\/d\u00e9form\u00e9s pour les compos\u00e9s \u00e9luant en premier<\/strong><\/td><td>Solvant de rin\u00e7age de l\u2019aiguille inappropri\u00e9<\/td><td>Si vous utilisez un solvant fort pour le rin\u00e7age interne de l\u2019aiguille, veillez \u00e0 rincer ensuite avec un solvant faible (de composition \u00e9gale aux conditions initiales de phase mobile) pour \u00e9viter l\u2019\u00e9largissement de la bande chromatographique.<\/td><\/tr><tr><td>Solvant d\u2019injection (de l\u2019\u00e9chantillon) inappropri\u00e9<\/td><td>R\u00e9duire le volume d\u2019injection pour les \u00e9chantillons dissous principalement dans l\u2019ac\u00e9tonitrile ou le m\u00e9thanol pour \u00e9viter l\u2019\u00e9largissement de la bande chromatographique<\/td><\/tr><tr><td><strong>Pic d\u00e9form\u00e9\/Perturbation de la ligne de base<\/strong><\/td><td>Le rin\u00e7age interne de l\u2019aiguille peut causer des perturbations de la ligne de base qui peuvent impacter la forme du pic<\/td><td>Lancer le rin\u00e7age interne de l\u2019aiguille une fois que tous les analytes ont \u00e9t\u00e9 \u00e9lu\u00e9s de la colonne analytique<\/td><\/tr><tr><td rowspan=\"2\"><strong>Rendement faible<\/strong><\/td><td>Contamination du passeur d\u2019\u00e9chantillons par la matrice<\/td><td>Optimiser le rin\u00e7age interne de l\u2019aiguille avec un solvant dans lequel la matrice est soluble<\/td><\/tr><tr><td>Rin\u00e7age de la cartouche ILSP insuffisant<\/td><td>Optimiser le solvant de rin\u00e7age ILSP pour compl\u00e8tement \u00e9liminer les compos\u00e9s interf\u00e9rents provenant de la matrice<\/td><\/tr><tr><td rowspan=\"2\"><strong>Pics de matrice dans les injections de blancs de solvant<\/strong><strong>&nbsp;<\/strong><\/td><td>Contamination du passeur d\u2019\u00e9chantillons par la matrice<\/td><td>Optimiser le rin\u00e7age interne de l\u2019aiguille avec un solvant dans lequel la matrice est soluble<\/td><\/tr><tr><td>Rin\u00e7age de la cartouche ILSP insuffisant<\/td><td>Optimiser le solvant de rin\u00e7age ILSP pour compl\u00e8tement \u00e9liminer les compos\u00e9s interf\u00e9rents provenant de la matrice<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n<div style=\"height:100px\" aria-hidden=\"true\" class=\"wp-block-spacer\"><\/div>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>Cet article d\u00e9taille comment d\u00e9terminer les conditions optimales de la pr\u00e9paration d&#8217;\u00e9chantillons en ligne et inclure l\u2019ILSP \u00e0 une m\u00e9thode existante pour augmenter le nombre d\u2019\u00e9chantillons 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