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Colonne LC Force a elevate prestazioni: Dai Forza ai tuoi Metodi LC

17 Dec 2020

feature GNSS2598
  • Robuste e riproducibili — tempi di ritenzione costanti e picchi stretti e simmetrici anche nelle condizioni estreme tipiche della UHPLC, come pressioni elevate e cicli rapidi.
  • Fasi stazionarie da 3 o 5 µm per HPLC e da 1,8 µm per UHPLC — facilitano il trasferimento e l’ottimizzazione dei metodi di analisi senza la necessità di calcoli complessi.
  • Qualità Premium e soddisfazione garantita al 100% — grazie a criteri di controllo qualità e produzione estremamente rigorosi.

Le nuove colonne LC Force a elevate prestazioni permettono di sfruttare al meglio il potenziale degli strumenti analitici, migliorando la produttività e trasferendo globalmente i metodi del laboratorio da un sistema HPLC – affidabile ma ormai datato – alla UHPLC, di nuova generazione e recente installazione. Dalla robustezza e stabilità estreme, questa linea di colonne è il frutto di oltre 20 anni di ricerche condotte in ambito LC, finalizzate a migliorare costantemente le fasi stazionarie, i test sul ciclo di vita e i lotti, il bonding e le tecniche di impaccamento dei nostri prodotti.

Soddisfa le esigenze di produttività di oggi e preparati per quelle di domani installando le colonne LC Force su tutti i tuoi strumenti.

La linea comprende le fasi bifenile e fluorofenile più apprezzate di Restek, dalla selettività elevata, e una C18 per uso generico.

  Bifenile
figure-article-GNSS2598-01.jpg
C18
figure-article-GNSS2598-02.jpg
Fluorofenile
figure-article-GNSS2598-03.jpg
Codice fase USP L11 L1 L43
Categoria fase stazionaria Fenile C18, octadecilsilano Propil Pentafluorofenile
Tipo di ligando Bifenile C18 End-capped Fluorofenile
Dimensione particelle 1.8 µm, 3 μm, or 5 μm
totalmente porose
1.8 µm, 3 μm, or 5 μm
totalmente porose
1.8 µm, 3 μm, or 5 μm
totalmente porose
Porosità 100 Å 100 Å 100 Å
Area superficiale 300 m2/g 300 m2/g 300 m2/g
Carico di carbonio 15% 20% 10%
End-Cap no
Range di pH 2.0 to 8.0 2.0 to 8.0 2.0 to 8.0
Temperatura massima 80 °C 80 °C 80 °C

Dai Forza ai tuoi Metodi LC… per una maggiore longevità

Le pressioni elevate e i cicli di analisi rapidi a cui sono sottoposte costituiscono seri limiti per le colonne LC e ne riducono la durata. Utilizzate nelle condizioni analitiche imposte dai moderni sistemi LC (pressioni più elevate, cicli sempre più rapidi, ecc.), alcune colonne in commercio non durano a lungo. Le colonne LC Force di Restek sono concepite e costruite per sopportare queste condizioni estreme. Che tu stia utilizzando una colonna da 3 o 5 μm su un vecchio sistema HPLC o una colonna da 1,8 μm con un sistema UHPLC di nuovissima generazione (Figure 1 e 2), l’eccellente durata delle colonne LC Force consente al tuo metodo di garantire la medesima separazione da un’iniezione all’altra

Figure 1:  A una pressione superiore a 700 bar (10.000 psi), l’efficienza di una colonna standard può ridursi durante le iniezioni. Con le colonne LC Force questo non accade!
Chart of percentage efficiency vs number of injections on 1.8 micron C18 Force LC Columns at 12,000 psi
Figure 2: Per la maggior parte delle colonne, gli sbalzi di pressione rappresentano limiti ancora più seri rispetto a una pressione elevata, ma le colonne LC Force sono in grado di gestire analisi ripetute mantenendo inalterata la separazione.
Injection Reproducibility for Isoflavones on Force C18 by UHPLC-MS

LC_FF0568

Peaks

PeaksSIR (m/z)
1.Daidzin417.2
2.Genistin433.2
3.Daidzein255.1
4.Genistein271.1

Conditions

ColumnForce C18 (cat.# 9634252)
Dimensions:50 mm x 2.1 mm ID
Particle Size:1.8 µm
Guard Column:UltraShield UHPLC precolumn filter 0.2 µm (cat.# 25810)
Temp.:50 °C
Standard/SampleCustom mix
Diluent:Water
Conc.:500 ng/mL
Inj. Vol.:2 µL
Mobile Phase
A:Water + 0.1% formic acid
B:Acetonitrile + 0.1% formic acid
Time (min)Flow (mL/min)%A%B
0.000.68515
1.500.6595
1.510.68515
3.000.68515
Max Pressure:500 bar
DetectorMS
Interface:ESI+
InstrumentUHPLC

Dai Forza ai tuoi Metodi LC … per una maggiore riproducibilità

Una volta sviluppato e validato un metodo di analisi, si passa allo sviluppo di un nuovo metodo; non c’è il tempo di rimettere in discussione periodicamente i metodi già validati perché i risultati non sono riproducibili da un lotto all’altro. La forma dei picchi e i tempi di ritenzione devono rimanere costanti per tutta la vita prevista per una determinata colonna, al fine di garantire risultati affidabili senza tempi di inattività imprevisti, preservando così la produttività del laboratorio. Le colonne LC Force sono caratterizzate da questa riproducibilità tra i diversi lotti (Figura 3) garantita al 100% da controlli di qualità sistematici e molto rigorosi: in questo modo potrai concentrarti solo sull’essenziale.

Figura 3: Ogni nuova colonna Force che ordinerai, nella versione standard C18 o nella versione fluorofenile con l’innovativo processo di bonding, garantirà la stessa riproducibilità e le stesse prestazioni dei lotti acquistati in precedenza.

Force C18

Lot Comparison for Isoflavones on Force C18 by UHPLC-MS

LC_FF0567

Peaks

PeaksSIR (m/z)
1.Daidzin417.2
2.Genistin433.2
3.Daidzein255.1
4.Genistein271.1

Conditions

ColumnForce C18 (cat.# 9634252)
Dimensions:50 mm x 2.1 mm ID
Particle Size:1.8 µm
Temp.:50 °C
Standard/SampleCustom mix
Diluent:Water
Conc.:500 ng/mL
Inj. Vol.:2 µL
Mobile Phase
A:Water + 0.1% formic acid
B:Acetonitrile + 0.1% formic acid
Time (min)Flow (mL/min)%A%B
0.000.68515
1.500.6595
1.510.68515
3.000.68515
Max Pressure:500 bar
DetectorMS
Interface:ESI+
InstrumentUHPLC

Force FluoroPhenyl

Lot Comparison for Nitrofurans on Force FluoroPhenyl by UHPLC-MS/MS

LC_FS0510

Peaks

PeaksPrecursor IonProduct IonProduct Ion
1.Nitrofurantoin239.1121.995.0
2.Nitrofurazone199.1107.954.0
3.Furazolidone226.295.067.0
4.Nifuroxazide276.2121.093.0

Conditions

ColumnForce FluoroPhenyl (cat.# 9639252)
Dimensions:50 mm x 2.1 mm ID
Particle Size:1.8 µm
Temp.:40 °C
Standard/Sample
Diluent:Water
Conc.:50 ng/mL
Inj. Vol.:5 µL
Mobile Phase
A:0.1% Acetic acid in water
B:Methanol
Time (min)Flow (mL/min)%A%B
0.000.47030
1.500.4595
1.510.47030
3.500.47030
DetectorMS/MS
Ion Mode:ESI+
Mode:MRM
InstrumentUHPLC

Dai Forza ai tuoi Metodi LC … per un trasferimento di metodo più semplice

Per risparmiare tempo, i metodi di analisi vengono spesso sviluppati con sistemi UHPLC e colonne con particelle di silice di dimensione inferiore a 2 μm. Spesso questi metodi devono essere successivamente adattati alle condizioni di pressione, ai tempi di analisi dei sistemi HPLC standard e alle colonne da 3 o 5 µm con cui si andrà effettivamente a lavorare. Per facilitare questo tipo di trasferimento e garantire risultati affidabili, le colonne LC Force sono disponibili per tre diverse dimensioni di particelle, tutte provenienti da una stessa e unica matrice di silice con le medesime caratteristiche, in modo da ottenere agevolmente le stesse separazioni affidabili, a prescindere dal tipo di strumento (Figura 4).

Naturalmente, con le colonne LC Force, il trasferimento di metodo può avvenire anche in senso inverso. Quindi un metodo sviluppato in HPLC standard può essere trasferito agevolmente in UHPLC per aumentare la produttività e diminuire notevolmente la quantità di solvente utilizzato e i costi di smaltimento degli scarti.

Figura 4: Utilizzando flussi isocratici identici, le colonne Force da 5, 3 e 1,8 μm producono gli stessi risultati. (Se si utilizza un gradiente, delle semplici equazioni possono aiutare a calcolare la pendenza del gradiente e i punti temporali). Trasferire i metodi sarà semplice!
Scalability of Force C18 Using Reversed Phase Test Mix

LC_GN0574

Peaks

PeakstR (min)
1.Uracil0.456
2.Toluene2.904
3.Naphthalene3.939
4.Biphenyl5.971

Conditions

ColumnForce, 100 x 2.1 mm (see above for particle sizes)
Temp.:30 °C
Standard/SampleUHPLC RP test mix
Diluent:Water:acetonitrile (50:50)
Inj. Vol.:2 µL
Mobile Phase
A:Water
B:Acetonitrile
Time (min)Flow (mL/min)%A%B
0.000.44555
8.000.44555
DetectorPDA @ 254 nm
InstrumentUHPLC

Le prestazioni delle colonne LC Force: la fase bifenile Restek testata e consolidata nel tempo

Dal 2005, la scelta migliore per le analisi farmaceutiche

  • Separazione dei composti in cui le fasi C18 o altre fasi feniliche non sono abbastanza selettive.
  • Possibilità di utilizzare le fasi mobili semplici compatibili con MS.
  • La fase LC di Restek più apprezzata.

Vantaggi:

  • Maggiore ritenzione dei soluti dipolari, insaturi o coniugati.
  • Maggiore selettività in associazione a fasi mobili a base di metanolo.
  • Ideale per aumentare la sensibilità e la selettività delle analisi LC-MS.

La bifenile è la scelta ideale:

  • quando una colonna C18 non è abbastanza selettiva;
  • quando cerchi una maggiore ritenzione degli aromatici idrofilici.
figure article GNSS2598 05

Profilo di interazione della colonna

Interazioni principali del soluto:

  • Polarizzabilità
  • Dispersione

Interazione secondaria del soluto:

  • Scambio cationico
figure article GNSS2598 06

Profilo di ritenzione del soluto:

Struttura degli analiti target:

  • Aromatici
  • Dipolari

Funzionalità degli analiti target:

  • Aromatici idrofilici
  • Dipoli forti
  • Acidi di Lewis
  • Composti dipolari, insaturi o coniugati
  • Composti ciclici con gruppi elettron-attrattori
figure article GNSS2598 07
Figura 5: Dal monitoraggio terapeutico dei farmaci alla tossicologia, le colonne Force bifenile sono studiate per le applicazioni in cui l’identificazione rapida e affidabile di farmaci e metaboliti è di importanza vitale.
Morphine and Metabolites on Force Biphenyl by UHPLC-MS/MS

LC_CF0677

Peaks

PeakstR (min)Precursor IonProduct IonProduct Ion
1.Morphine-3-β-D-glucuronide0.70462.1286.0152.1
2.Morphine1.26286.1164.9152.0
3.Morphine-6-β-D-glucuronide1.34462.1286.0152.1
4.Morphine-N-oxide1.41302.1284.9161.9
5.6-Acetylmorphine1.86328.1211.1165.0

Conditions

ColumnForce Biphenyl (cat.# 9629252)
Dimensions:50 mm x 2.1 mm ID
Particle Size:1.8 µm
Temp.:35 °C
Standard/Sample
Diluent:0.1% Formic acid in water
Conc.:50 ng/mL
Inj. Vol.:5 µL
Mobile Phase
A:0.1% Formic acid in water
B:0.1% Formic acid in methanol
Time (min)Flow (mL/min)%A%B
0.000.58515
0.500.58515
2.000.53070
2.010.58515
4.000.58515
DetectorMS/MS
Ion Mode:ESI+
Mode:MRM
InstrumentUHPLC
Figura 6: L’accuratezza della quantificazione è fondamentale per i farmaci cardiaci, dall’intervallo terapeutico ristretto: la fase Restek bifenile applicata a una colonna LC Force è la scelta ideale.
Cardiac Drugs on Force Biphenyl by LC-MS/MS

LC_CF0675

Peaks

PeakstR (min)Precursor IonProduct IonProduct IonPolarity
1.Digoxin0.95798.4651.4355.1+
2.Flecainide1.28415.3397.9300.9+
3.Furosemide1.32329.0205.2285.1
4.Verapamil1.68455.1165.2150.0+
5.Digitoxin1.85782.4635.2243.1+
6.Amiodarone3.17646.158.186.2+

Conditions

ColumnForce Biphenyl (cat.# 9629252)
Dimensions:50 mm x 2.1 mm ID
Particle Size:1.8 µm
Temp.:40 °C
Standard/Sample
Diluent:Water:acetonitrile (90:10)
Conc.:100 ng/mL
Inj. Vol.:2 µL
Mobile Phase
A:Water + 5 mM ammonium formate + 0.1% formic acid
B:Acetonitrile + 0.1% formic acid
Time (min)Flow (mL/min)%A%B
0.000.36040
3.500.3595
3.510.36040
5.50.36040
DetectorMS/MS
Ion Mode:ESI+/ESI-
Mode:Scheduled MRM
InstrumentUHPLC

Le prestazioni delle colonne LC Force: la fase generica C18 Restek

Force C18: le prestazioni, l’evoluzione e la qualità Force applicate a una fase C18

  • Utilizzabile in un ampio range di pH a garanzia di risultati affidabili per le più svariate applicazioni.
  • Forte ritenzione idrofobica.

Vantaggi:

  • Compatibilità con un’ampia gamma di fasi mobili, da moderatamente acide a neutre (pH da 2 a 8).
  • Analisi rapide e affidabili per le applicazioni più diverse (bioanalisi, sicurezza alimentare, settore ambientale, ecc.)

La C18 è la scelta ideale:

  • per tutte le principali analisi in fase inversa;
  • laddove sia richiesta una forte ritenzione idrofobica.
figure article GNSS2598 08

Profilo di interazione della colonna:

Interazione principale del soluto:

  • Dispersione
figure article GNSS2598 09

Profilo di ritenzione del soluto:

Struttura degli analiti target:

  • Idrocarburi

Funzionalità degli analiti target:

  • Composti idrofobici
figure article GNSS2598 10
Figura 7: La fase C18 è generalmente la prima fase scelta da chi sviluppa i metodi e, come illustrato per questi isoflavoni comuni nei nutraceutici, la Force C18 è la scelta migliore
Analysis of Isoflavones on Force C18 by UHPLC-MS

LC_FF0566

Peaks

PeakstR (min)SIR (m/z)
1.Daidzin0.622417.2
2.Genistin0.949433.2
3.Daidzein1.174255.1
4.Genistein1.314271.1

Conditions

ColumnForce C18 (cat.# 9634252)
Dimensions:50 mm x 2.1 mm ID
Particle Size:1.8 µm
Temp.:50 °C
Standard/SampleCustom mix
Diluent:Water
Conc.:500 ng/mL
Inj. Vol.:2 µL
Mobile Phase
A:Water + 0.1% formic acid
B:Acetonitrile + 0.1% formic acid
Time (min)Flow (mL/min)%A%B
0.000.68515
1.500.6595
1.510.68515
3.000.68515
Max Pressure:500 bar
DetectorMS
Interface:ESI+
InstrumentUHPLC

Tech Tip: Proteggi le colonne dalle micro-particelle

È sempre consigliabile proteggere la colonna. Per le colonne LC Force da 3 e 5 µm, Restek offre le cartucce per precolonne EXP. E per le colonne da 1,8 µm, dove il volume aggiuntivo di una precolonna può risultare un problema, cerca i filtri precolonna UHPLC UltraShield con frit da 0,2 μm. Il volume morto ridotto di questo filtro (1 μL) lo rende la scelta ideale per applicazioni UHPLC fino a 15.000 psi.

Figura 8: È possibile abbinare un filtro precolonna UltraShield alle colonne Force da 1,8 μm per prolungarne la durata senza modificare significativamente i tempi di ritenzione.
Comparison of Isoflavones on Force C18 with and without UltraShield by UHPLC-MS

LC_FF0569

Peaks

PeaksSIR (m/z)
1.Daidzin417.2
2.Genistin433.2
3.Daidzein255.1
4.Genistein271.1

Conditions

ColumnForce C18 (cat.# 9634252)
Dimensions:50 mm x 2.1 mm ID
Particle Size:1.8 µm
Guard Column:UltraShield UHPLC precolumn filter 0.2 µm (cat.# 25810)
Temp.:50 °C
Standard/SampleCustom mix
Diluent:Water
Conc.:500 ng/mL
Inj. Vol.:2 µL
Mobile Phase
A:Water + 0.1% formic acid
B:Acetonitrile + 0.1% formic acid
Time (min)Flow (mL/min)%A%B
0.000.68515
1.500.6595
1.510.68515
3.000.68515
Max Pressure:500 bar
DetectorMS
Interface:ESI+
InstrumentUHPLC
Figura 9: L’analisi delle xantine può avvenire in ambito clinico, alimentare e sportivo (per i controlli antidoping). La colonna Force fluorofenile consente di analizzare simultaneamente una moltitudine di composti, incluse la paraxantina e la teofillina.
Xanthines on Force FluoroPhenyl by LC/MS/MS

LC_CF0672

Peaks

PeakstR (min)Conc.
(ng/mL)
Precursor IonProduct IonProduct Ion
1.Theobromine1.5350181.13137.95163.01
2.Theophylline1.7950181.13124.0296.03
3.Paraxanthine1.9550181.13124.0296.03
4.Caffeine2.3350195.09138.01110.03

Conditions

ColumnForce FluoroPhenyl (cat.# 9639212)
Dimensions:100 mm x 2.1 mm ID
Particle Size:1.8 µm
Temp.:40 °C
Standard/Sample
Diluent:70:30 Water:methanol
Conc.:50 ng/mL
Inj. Vol.:5 µL
Mobile Phase
A:0.1% Formic acid in water
B:Methanol
Time (min)Flow (mL/min)%A%B
0.000.37030
2.50.33070
3.00.30100
3.010.37030
5.00.37030
DetectorMS/MS
Ion Mode:ESI+
Mode:MRM
InstrumentUHPLC
Figura 10: La colonna Force fluorofenile di Restek garantisce un’elaborazione rapida ed efficace dei nitrofurani, impiegati di frequente negli alimenti animali con una funzione antibiotica/antimicrobica, ma vietati in molte zone.
Nitrofurans on Force FluoroPhenyl by UHPLC-MS/MS

LC_FS0507

Peaks

PeakstR (min)Precursor IonProduct IonProduct Ion
1.Nitrofurantoin0.94239.1121.995.0
2.Nitrofurazone0.99199.1107.954.0
3.Furazolidone1.12226.295.067.0
4.Nifuroxazide1.40276.2121.093.0

Conditions

ColumnForce FluoroPhenyl (cat.# 9639252)
Dimensions:50 mm x 2.1 mm ID
Particle Size:1.8 µm
Temp.:40 °C
Standard/Sample
Diluent:Water
Conc.:50 ng/mL
Inj. Vol.:5 µL
Mobile Phase
A:0.1% Acetic acid in water
B:Methanol
Time (min)Flow (mL/min)%A%B
0.000.47030
1.500.4595
1.510.47030
3.500.47030
DetectorMS/MS
Ion Mode:ESI+
Mode:MRM
InstrumentUHPLC
Figura 11: La ritenzione della metformina, farmaco antidiabetico diffuso, è difficile da ottenere nelle condizioni tipiche della fase inversa; tuttavia, nella modalità HILIC, le colonne Force fluorofenile sono in grado di garantire risultati soddisfacenti in meno di 3 minuti, riducendo la potenziale soppressione ionica causata da interferenze della matrice a rapida eluizione. 
Metformin on Force FluoroPhenyl by UHPLC-MS/MS

LC_CF0671

Peaks

PeakstR (min)Precursor IonProduct Ion Product Ion
1.Metformin1.00130.371.060.1

Conditions

ColumnForce FluoroPhenyl (cat.# 9639252)
Dimensions:50 mm x 2.1 mm ID
Particle Size:1.8 µm
Temp.:40 °C
Standard/Sample
Diluent:Acetonitrile
Conc.:100 ng/mL
Inj. Vol.:2 µL
Mobile Phase
A:0.1% Formic acid in water
B:0.1% Formic acid in acetonitrile
Time (min)Flow (mL/min)%A%B
0.000.63070
1.50.69010
1.510.63070
2.50.63070
DetectorMS/MS
Ion Mode:ESI+
Mode:MRM
InstrumentUHPLC

SPP o FPP?

Le particelle superficialmente porose (SPP) godono di una diffusione sempre maggiore in quanto forniscono analisi più veloci ed efficienti senza le elevate pressioni della UHPLC. Quando la velocità è il tuo obiettivo, Restek consiglia la linea Raptor di colonne LC (www.restek.com/raptor).

Tuttavia, spesso la ritenzione è altrettanto importante per migliorare la forma dei picchi e la sensibilità in MS: in questo caso le colonne LC della linea Force con particelle totalmente porose (FPP) si rivelano la scelta ideale.

In entrambi i casi, Restek ha una colonna LC affidabile e ad alte prestazioni.

figure article GNSS2598 14
SPP
figure article GNSS2598 15
FPP
figure article GNSS2598 16
teaser product lc columns inert lc 02

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Author

  • Restek Corporation

    Restek is a leading provider of chromatography columns, accessories, and certified reference materials. Trust Restek for reliable, high-quality analytical solutions.

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