Lo stato della California richiede l\u2019analisi di pesticidi, micotossine e cannabinoidi in tutti i tipi di prodotti derivati dalla cannabis [1]. Per questo motivo \u00e8 fondamentale sviluppare flussi di lavoro affidabili che consentano di determinare facilmente tali analiti in diverse matrici. Le caramelle gommose alla cannabis sono un prodotto alimentare molto diffuso, la cui composizione le rende una matrice altamente complessa. In questo studio illustreremo un flusso di lavoro completo, che utilizza un\u2019unica procedura di estrazione, per l\u2019analisi nelle caramelle gommose dei pesticidi, delle micotossine e dei cannabinoidi indicati dal governo californiano.<\/p>\n\n\n\n
I prodotti alimentari arricchiti di cannabis o cannabidiolo (CBD) sono sempre pi\u00f9 diffusi fra i consumatori di cannabis. In ambito analitico, \u00e8 obbligatorio eseguire analisi di potenza dei prodotti alimentari in tutti gli Stati che richiedono per legge le analisi di laboratorio. Inoltre, lo stato della California prevede anche la determinazione di contaminanti, come pesticidi e micotossine, negli alimenti e in altri tipi di prodotti derivati dalla cannabis. Data l\u2019ampia variet\u00e0 di prodotti alimentari disponibili in commercio, per ottenere dati affidabili per tutti gli analiti di interesse e in qualsiasi tipo di matrice \u00e8 necessario adottare strategie analitiche differenti. Fra i vari tipi di prodotti alimentari a base di cannabis, le caramelle gommose rappresentano una grande sfida per i laboratori di analisi;<\/p>\n\n\n\n
si tratta di una matrice \u201cappiccicosa\u201d composta in genere da zucchero, amido, pectina e gelatina. Data la composizione del campione, le strategie di preparazione per l\u2019analisi di potenza solitamente prevedono una fase di solubilizzazione in solventi come acqua o DMSO, oppure, in alternativa, si possono utilizzare grandi volumi di solventi come il metanolo. Una volta omogenizzato il campione, i cannabinoidi vengono quantificati tramite HPLC-UV iniettando l\u2019estratto diluito direttamente oppure dopo una fase di salting-out eseguita con i sali QuEChERS. Esistono poche informazioni di dominio pubblico relative all\u2019analisi di contaminanti come pesticidi e micotossine in matrici di caramelle gommose; \u00e8 infatti disponibile un solo report che illustra i dati semi-quantitativi di 35 pesticidi utilizzando i QuEChERS [2].<\/p>\n\n\n\n
In questo studio delineiamo un flusso di lavoro affidabile per la determinazione quantitativa nei campioni di caramelle gommose di pesticidi, micotossine e cannabinoidi presenti nell’elenco stilato dal governo californiano. La metodologia ottimizzata di preparazione prevede la solubilizzazione del campione, seguita da una fase di estrazione con acetonitrile acidificato e un passaggio di salting-out per il quale si utilizzano i sali QuEChERS per EN. Per l\u2019analisi di cannabinoidi e contaminanti compatibili con la LC \u00e8 stata condotta una diluizione semplice prima dell\u2019iniezione, mentre per i pesticidi analizzabili in GC, prima dell\u2019analisi, \u00e8 stato necessario utilizzare una miscela di sorbente dSPE contenente ammine primarie\/secondarie (PSA), nero di carbonio grafitato (GCB) e solfato di magnesio. Nel complesso, il flusso di lavoro proposto per l\u2019analisi di pesticidi, micotossine e cannabinoidi nelle caramelle gommose alla cannabis ha fornito risultati soddisfacenti in termini di linearit\u00e0, accuratezza, precisione e limiti di quantificazione (LOQ).<\/p>\n\n\n\n
A valle dei test preliminari sui vari parametri sperimentali \u00e8 stato implementato il seguente flusso di lavoro (Figura 1). \u00c8 stato pesato 1\u202fg di caramelle tritate in una provetta da 50 mL (cat.# 25846) e sono stati aggiunti 5 mL di acqua. I campioni sono stati poi vortexati con forza finch\u00e9 i pezzi di caramella si sono solubilizzati. La soluzione del campione \u00e8 stata poi adeguatamente fortificata con analiti target e\/o standard interni (gli standard interni sono stati utilizzati solo per l\u2019analisi dei contaminanti e non per l\u2019analisi di potenza). Dopodich\u00e9 il tutto \u00e8 stato vortexato per ulteriori 30 secondi. A seguire, sono stati aggiunti 5 mL di acetonitrile acidificato con acido acetico (1% v:v) e i campioni sono stati nuovamente vortexati per 30 secondi. \u00c8 stato aggiunto un pacchetto di sali di estrazione Q-sep QuEChERS per la norma europea EN\u202f15662 (cat.# 25849), poi il campione \u00e8 stato passato nuovamente al vortex e centrifugato per 5 minuti.<\/p>\n\n\n\n
Per l\u2019analisi di potenza sono stati miscelati 100 \u00b5L di estratto del campione e 900 \u00b5L di 25:75 acqua:acetonitrile, mentre 2 \u00b5L sono stati analizzati in LC-UV. Per quanto riguarda i contaminanti compatibili con la LC, sono stati miscelati 750 \u00b5L di estratto del campione e 250\u202f\u00b5L di acqua, mentre 2 \u03bcL sono stati analizzati in LC-MS\/MS. Sul fronte invece dei contaminanti analizzabili in GC, sono stati trasferiti 1,9\u202fmL di estratto in una provetta dSPE Q-sep QuEChERS contenente sorbenti pre-pesati di PSA, GCB e solfato di magnesio (cat.# 26217). Dopo il passaggio al vortex e la centrifuga sono stati miscelati 500 \u03bcL di estratto con 500 \u03bcL di 1% di acido acetico in acetonitrile, mentre 1\u202f\u03bcL \u00e8 stato analizzato in GC-MS\/MS.<\/p>\n\n\n