{"id":45315,"date":"2021-01-12T00:00:00","date_gmt":"2021-01-12T00:00:00","guid":{"rendered":"https:\/\/discover.restek.com\/uncategorized\/ottimizzare-lanalisi-gc-ms-e-gc-ms-ms-del-3-mcpd-e-dei-glicidil-esteri-negli-oli-alimentari\/"},"modified":"2026-01-28T22:09:30","modified_gmt":"2026-01-28T22:09:30","slug":"ottimizzare-lanalisi-gc-ms-e-gc-ms-ms-del-3-mcpd-e-dei-glicidil-esteri-negli-oli-alimentari","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/discover.restek.com\/it\/application-notes-it\/fsan3303-it\/ottimizzare-lanalisi-gc-ms-e-gc-ms-ms-del-3-mcpd-e-dei-glicidil-esteri-negli-oli-alimentari","title":{"rendered":"Ottimizzare l\u2019analisi GC-MS e GC-MS\/MS del 3-MCPD e dei glicidili esteri negli oli alimentari"},"content":{"rendered":"\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Abstract<\/h2>\n\n\n\n<p>Il 3-MCPD e i glicidil esteri negli oli alimentari sono contaminanti che si formano durante i processi di raffinazione e sono stati classificati&nbsp;come potenzialmente cancerogeni per gli esseri umani. ISO, AOCS e DGF hanno sviluppato dei metodi per l\u2019analisi del 3-MCPD e dei glicidil&nbsp;esteri che descrivono dettagliatamente le tecniche di estrazione e derivatizzazione, ma non forniscono molte indicazioni sul metodo di analisi&nbsp;GC-MS. Con l\u2019emergere di sistemi automatizzati in grado di sveltire la preparazione dei campioni, \u00e8 importante semplificare e velocizzare&nbsp;l\u2019analisi ottimizzando le condizioni del metodo e le tecniche di iniezione.<\/p>\n\n\n\n<p>La nostra ottimizzazione iniziale del programma di temperatura del forno GC ci ha consentito di ridurre il tempo di analisi di 8 minuti;&nbsp;tuttavia \u00e8 possibile risparmiare pi\u00f9 tempo utilizzando il software gratuito per lo sviluppo di metodi (modellatore di cromatogrammi&nbsp;Pro&nbsp;<em>EZ<\/em>GC). I metodi attualmente pubblicati raccomandano l\u2019utilizzo degli iniettori split\/splitless o PTV azionati in modalit\u00e0 splitless.&nbsp;Esaminando l\u2019iniezione split abbiamo osservato dei miglioramenti inaspettati delle forme del picco. Tuttavia, contrariamente alle aspettative,&nbsp;la tecnica di iniezione split ha anche raggiunto limiti di rilevabilit\u00e0 simili a quelli ottenuti con il metodo di iniezione splitless.<\/p>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Introduzione<\/h2>\n\n\n\n<p>Gli esteri del 3-monocloropropandiolo (3-MCPD) sono contaminanti presenti in vari oli raffinati e si formano a partire dagli acilgliceroli&nbsp;presenti naturalmente in composti clorurati durante i processi di deodorizzazione ad alta temperatura [1] Negli oli raffinati la concentrazione&nbsp;\u00e8 variabile, e i quantitativi maggiori si trovano nell\u2019olio di palma e di noci. Studi effettuati su animali mostrano che gli esteri del 3-MCPD&nbsp;vengono idrolizzati nell\u2019apparato gastrointestinale per rilasciare il 3-MCPD, una sostanza tossica. Nei ratti e nei topi, gli organi in cui si&nbsp;registrano i maggiori effetti tossici sono i reni e il sistema riproduttivo maschile [2].<\/p>\n\n\n\n<p>Anche i glicidil esteri sono contaminanti presenti negli oli raffinati, ma sono generati da un processo diverso da quello degli esteri del&nbsp;3-MCPD [3]. I glicidil esteri si formano a partire dai diacilgliceroli ad alte temperature (&gt;240 \u00b0C), e la reazione avviene anche in assenza&nbsp;di composti clorurati. Dopo il consumo hanno un destino simile a quello degli esteri del 3-MCPD, ovvero vengono idrolizzati in glicidolo&nbsp;nell&#8217;apparato gastrointestinale. Studi condotti sugli animali hanno dimostrato che il glicidolo \u00e8 genotossico e cancerogeno. La figura 1 mostra&nbsp;le strutture chimiche di questi composti.<\/p>\n\n\n<div class=\"wp-block-custom-chromatogram-article-top\"><div class=\"chromatogram-article-placeholder\"><div class=\"figure-heading\"><strong>Figura 1:<\/strong>\u00a0Strutture chimiche del 3-MCPD, degli esteri del 3-MCPD, del glicidolo e dei glicidil esteri.<\/div><div class='chromatogram-article-inner-full'><div class=\"chromatogram-article-inner\">\n<style>.kb-image45315_eabfc0-62 .kb-image-has-overlay:after{opacity:0.3;}<\/style>\n<div class=\"wp-block-kadence-image kb-image45315_eabfc0-62\"><figure class=\"aligncenter size-large\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"1024\" height=\"584\" src=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/\/figure-article-FSAN3303-01-1024x584.jpg\" alt=\"\" class=\"kb-img wp-image-19988\" title=\"-\" srcset=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-01-1024x584.jpg 1024w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-01-300x171.jpg 300w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-01-768x438.jpg 768w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-01-1536x876.jpg 1536w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-01.jpg 1800w\" sizes=\"auto, (max-width: 1024px) 100vw, 1024px\" \/><\/figure><\/div>\n\n<\/div><\/div><\/div>\n\n\n<p>Con il tentativo dell\u2019industria alimentare di ridurre sempre pi\u00f9 l\u2019utilizzo di oli parzialmente idrogenati, gli acidi grassi&nbsp;<em>trans<\/em>&nbsp;non sono pi\u00f9&nbsp;considerati un argomento di studio prioritario. Ora al centro delle analisi vi sono i derivati dalla raffinazione dell\u2019olio. Il 3-MCPD e i glicidil&nbsp;esteri (GE) sono sostanze sospettate di essere cancerogene e sebbene la Food and Drug Administration (FDA) americana non preveda limiti,&nbsp;l\u2019Autorit\u00e0 europea per la sicurezza alimentare (EFSA) ha stabilito una dose giornaliera tollerabile di 3-MCPD pari a 2 \u00b5g per kg peso corporeo&nbsp;[4]. L\u2019Unione europea (UE) ha fissato i seguenti limiti massimi per il contenuto di esteri del 3-MCPD negli oli: 1,25 mg\/kg per gli oli raffinati&nbsp;e non raffinati selezionati, quali l\u2019olio di oliva (eccetto l\u2019olio di sansa), l\u2019olio di girasole, l\u2019olio di soia, l\u2019olio di semi di palma, e 2,5 mg\/kg per altri&nbsp;oli vegetali raffinati e oli marini e di pesce [5].<\/p>\n\n\n\n<p>Per le analisi degli isomeri degli esteri del MCPD e dei glicidil esteri si possono utilizzare due approcci, diretto o indiretto. Il metodo diretto&nbsp;solitamente implica l\u2019impiego di un sistema LC-MS in grado di fornire informazioni complete sulla composizione dei campioni senza trasformazioni chimiche del MCPD o dei glicidil esteri. Senza la fase di transesterificazione non dovrebbe verificarsi la trasformazione degli esteri del&nbsp;MCPD in glicidil esteri e viceversa, sebbene l\u2019alto contenuto di trigliceridi dovrebbe essere eliminato per impedire una sottostima dei composti target causata da queste interferenze. Durante questa fase occorre fare attenzione per garantire che attraverso la procedura di purificazione&nbsp;dei campioni non vengano eliminati anche il MCPD e i glicidil esteri. Inoltre, sono necessari standard specifici per una quantificazione precisa&nbsp;degli esteri, nonch\u00e9 strumenti altamente sensibili, come uno strumento MS ad alta risoluzione, per la loro determinazione.<\/p>\n\n\n\n<p>Il secondo approccio consiste in un&#8217;analisi indiretta. Questa metodologia \u00e8 pi\u00f9 adatta ad analisi ordinarie in quanto \u00e8 necessaria una quantit\u00e0&nbsp;di standard nettamente inferiore e la preparazione dei campioni pu\u00f2 avvenire tramite un sistema automatizzato. Tali standard comprendono&nbsp;i tre metodi AOCS (Cd 29a-13, Cd 29b-13 e Cd 29c-13) per l\u2019analisi del MCPD e dei glicidil esteri negli oli alimentari. Tutti e tre i metodi&nbsp;seguono un iter simile: transesterificazione per convertire i trigliceridi in esteri metilici degli acidi grassi (FAME);&nbsp;<em>neutralizzazione<\/em>&nbsp;delle&nbsp;condizioni alcaline derivanti dalla transesterificazione;&nbsp;<em>estrazione<\/em>&nbsp;dei FAME come fase di purificazione. All\u2019estrazione del MCPD libero e&nbsp;del glicidolo [trasformato in MCPD o in monobromopropandiolo (MBPD) a seconda del metodo specifico scelto] segue la derivatizzazione&nbsp;con acido fenilboronico (PBA) per migliorare la volatilit\u00e0 degli analiti rendendoli pi\u00f9 inclini alla separazione GC e all\u2019analisi MS o MS\/MS.&nbsp;Questi metodi descrivono dettagliatamente la manipolazione dei campioni, ma non forniscono molte indicazioni relativamente al metodo di&nbsp;analisi GC-MS. L\u2019emergere di sistemi automatizzati per la preparazione dei campioni consente di sveltire tale procedura. \u00c8 inoltre possibile&nbsp;ottimizzare il metodo analitico per migliorare le prestazioni globali.<\/p>\n\n\n\n<p>Grazie ai metodi AOCS \u00e8 possibile infatti ottimizzare il programma di temperatura del forno per velocizzare l\u2019analisi, il che, pur non comportando necessariamente un aumento della produzione di campioni perch\u00e9 anche i processi automatizzati per la preparazione dei campioni&nbsp;potrebbero durare pi\u00f9 a lungo dell\u2019analisi stessa, offre sicuramente l\u2019opportunit\u00e0 di condizionare con maggiore cura la colonna tra un\u2019analisi e&nbsp;l\u2019altra o persino semplicemente di consentire misure di contenimento dei costi come la riduzione del flusso di gas tra un\u2019analisi e l\u2019altra.<\/p>\n\n\n\n<p>Oltre al programma di temperatura del forno, \u00e8 stata analizzata anche la tecnica di iniezione per determinare se con le iniezioni split si&nbsp;potessero ottenere risultati accettabili. Di norma, i metodi prevedono l\u2019utilizzo di iniezioni splitless mediante iniettori split\/splitless o con&nbsp;vaporizzazione a temperatura programmabile (PTV); tuttavia, impiegando un\u2019iniezione split, in particolare per i metodi di preparazione&nbsp;dei campioni che prevedono la derivatizzazione degli analiti, \u00e8 possibile ridurre drasticamente la quantit\u00e0 di reagente di derivatizzazione&nbsp;che viene trasferito alla colonna e, di conseguenza, aumentare potenzialmente la durata della colonna.<\/p>\n\n\n\n<p>Abbiamo valutato l\u2019utilizzo di due iniettori diversi (PTV e split\/splitless), come pure due modalit\u00e0 di iniezione (split e splitless) a varie&nbsp;temperature. La valutazione delle prestazioni del metodo si \u00e8 basata su limiti di rilevabilit\u00e0 strumentali (limits of detection, LOD) e sulla&nbsp;sensibilit\u00e0 del metodo misurata mediante la pendenza della curva di calibrazione.<\/p>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Studio sperimentale<\/h2>\n\n\n\n<h3 class=\"wp-block-heading\">Sostanze chimiche e materiali<\/h3>\n\n\n\n<p>I solventi di grado LC-MS sono stati acquistati presso Fisher Scientific. L\u2019etere dietilico, il 3-MCPD libero, il metossido di sodio (in metanolo 25%),&nbsp;l\u2019idrossido di sodio, il cloruro di sodio, il bromuro di sodio, l\u2019acido solforico (25%), l\u2019acido ortofosforico (85%) e l\u2019acido fenilboronico sono stati&nbsp;acquistati presso Sigma Aldrich. Il 2-MCPD libero, il 2-MCPD-d<sub>5<\/sub>&nbsp;e il glicidil-d<sub>5&nbsp;<\/sub>stearato, sono stati acquistati presso Toronto Research Chemicals.&nbsp;Le soluzioni di dipalmitato-3-MCPD, dipalmitato-3-MCPD-d<sub>5<\/sub>&nbsp;e glicidil stearato erano standard custom di Restek Corporation. Gli standard sono&nbsp;stati conservati a una temperatura di -20 \u00b0C. Per fornire una matrice bianca, l\u2019olio extra vergine di oliva (EVOO) \u00e8 stato acquistato da un negozio di&nbsp;alimentari locale e conservato al buio a temperatura ambiente.<\/p>\n\n\n\n<h3 class=\"wp-block-heading\">Preparazione del campione<\/h3>\n\n\n\n<p>Gli standard custom Restek sono stati utilizzati come soluzioni di lavoro unitamente a soluzioni preparate con materiali puliti. Gli standard&nbsp;di calibrazione (esteri di 3-MCPD o glicidil esteri) sono stati preparati per coprire un range di 0,002\u201312 mg\/kg nell\u2019olio.<\/p>\n\n\n\n<p>Per l\u2019analisi sono stati successivamente preparati campioni di EVOO fortificato utilizzando versioni modificate dei metodi AOCS Cd 29b-13&nbsp;e Cd 29c-13 (la Figura 2 mostra lo schema del metodo Cd 29c-13). Le modifiche ai metodi pubblicati sono state effettuate principalmente per&nbsp;ridurre la quantit\u00e0 di solvente utilizzato. I campioni di olio in entrambi i protocolli sono stati dissolti nel metil-t-butil etere (in sostituzione&nbsp;dell\u2019etere dietilico nel metodo Cd 29b-13). Durante la seconda fase di estrazione (Figura 2), la quantit\u00e0 di acetato di etilene\/etere dietilico \u00e8 stata&nbsp;ridotta a 500 \u00b5L a estrazione (totale 1,5 mL). I campioni utilizzati a fini qualitativi sono stati lasciati nel solvente a base di acetato di etilene\/etere&nbsp;dietilico. Per ulteriori dettagli sui metodi si rimanda al relativo metodo AOCS.<\/p>\n\n\n<div class=\"wp-block-custom-chromatogram-article-top\"><div class=\"chromatogram-article-placeholder\"><div class=\"figure-heading\"><strong>Figura 2:<\/strong>\u00a0Procedura di preparazione dei campioni secondo AOCS Cd 13c-29.<\/div><div class='chromatogram-article-inner-full'><div class=\"chromatogram-article-inner\">\n<style>.kb-image45315_2548df-a9 .kb-image-has-overlay:after{opacity:0.3;}<\/style>\n<div class=\"wp-block-kadence-image kb-image45315_2548df-a9\"><figure class=\"aligncenter size-large\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"1024\" height=\"305\" src=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/\/figure-article-FSAN3303-02-1024x305.jpg\" alt=\"\" class=\"kb-img wp-image-19994\" title=\"-\" srcset=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-02-1024x305.jpg 1024w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-02-300x90.jpg 300w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-02-768x229.jpg 768w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-02-1536x458.jpg 1536w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-02.jpg 1800w\" sizes=\"auto, (max-width: 1024px) 100vw, 1024px\" \/><\/figure><\/div>\n\n<\/div><\/div><\/div>\n\n\n<div style=\"height:20px\" aria-hidden=\"true\" class=\"wp-block-spacer\"><\/div>\n\n\n\n<h3 class=\"wp-block-heading\">Modello Pro&nbsp;<em>EZ<\/em>GC<\/h3>\n\n\n\n<p>La versione online del software Restek del modellatore di cromatogrammi Pro&nbsp;<em>EZ<\/em>GC (<strong>www.restek.com\/it\/ezgc<\/strong>) \u00e8 uno strumento di selezione che&nbsp;si basa su una libreria precaricata di indici di ritenzione termodinamici. Gli indici di ritenzione termodinamici sono stati generati per le colonne&nbsp;Rxi-17Sil MS. Per generare gli indici sono stati utilizzati i seguenti composti: 3-MCPD, 3-MCPD-d<sub>5<\/sub>, 2-MCPD, 2-MCPD-d<sub>5<\/sub>&nbsp;liberi, glicidil estere, e&nbsp;glicidil-d<sub>5<\/sub>&nbsp;estere. Il 3-MCPD, il 3-MCPD-d<sub>5<\/sub>&nbsp;, il 2-MCPD, il 2-MCPD-d<sub>5<\/sub>&nbsp;liberi sono stati dissolti nell\u2019acetato di etilene e derivatizzati con PBA prima&nbsp;dell\u2019analisi. Il glicidil estere e il glicidil-d<sub>5<\/sub>&nbsp;estere sono stati trasformati rispettivamente in 3-MBPD e 3-MBPD-d<sub>5<\/sub>&nbsp;liberi, e poi derivatizzati con PBA&nbsp;secondo il metodo AOCS Cd 29b-13 modificato. I campioni per il modello Pro&nbsp;<em>EZ<\/em>GC sono stati preparati in concentrazioni di 50-100 \u00b5g\/mL.<\/p>\n\n\n\n<h3 class=\"wp-block-heading\">Strumentazione<\/h3>\n\n\n\n<p>Per gli esperimenti per l\u2019ottimizzazione del metodo e le analisi a concentrazione pi\u00f9 elevata \u00e8 stato utilizzato un Agilent 7890A GC abbinato&nbsp;a un 5975C MSD. Per le analisi delle tracce \u00e8 stato utilizzato un Thermo Fisher Scientific Trace 1310 GC abbinato a un TSQ 8000 MS\/MS.&nbsp;Per il trattamento dei dati sono stati utilizzati i software Agilent MSD Chemstation (versione F.01.03) e Thermo Scientific TraceFinder&nbsp;(versione 4.1 EFS). I test sono stati effettuati utilizando due colonne Rxi-17Sil MS di dimensioni 30 m x 0,25 mm x 0,25 \u00b5m (<strong>cat. n\u00b0 14123<\/strong>)&nbsp;e 20 m x 0,18 mm x 0,18 \u00b5m (<strong>cat. n\u00b0 14102<\/strong>). La colonna da 20 m \u00e8 stata utilizzata nello strumento Agilent, quella da 30 m in entrambi gli strumenti. Un Topaz Liner a cono singolo con ID 2,0 mm con lana di vetro \u00e8 stato utilizzato per lo strumento Agilent (<strong>cat. n\u00b0 23316<\/strong>), e un Topaz&nbsp;Baffled Liner con ID 2,0 mm per PTV \u00e8 stato utilizzato per lo strumento Thermo (<strong>cat. n\u00b0 23438<\/strong>). In entrambi gli strumenti \u00e8 stato utilizzato un flusso costante di elio. I programmi di temperatura per gli iniettori e i forni delle colonne sono indicati nella tabella I. Le impostazioni&nbsp;iniziali sono state desunte dai metodi AOCS Cd 29b-13 e Cd 29c-13. Per determinare i programmi finali, la temperatura iniziale di entrambi&nbsp;i programmi PTV e GC \u00e8 stata variata tra 85 \u00b0C e 120 \u00b0C.<\/p>\n\n\n\n<p><strong>Tabella I:<\/strong>&nbsp;Programmi di temperatura dell\u2019iniettore e del forno.<\/p>\n\n\n\n<figure class=\"wp-block-table\"><table class=\"has-fixed-layout\"><thead><tr><th>&nbsp;<\/th><th><strong>Metodo<\/strong><\/th><th><strong>Programma finale<\/strong><\/th><\/tr><\/thead><tbody><tr><td>Colonna<br>da 20 m<\/td><td>Nessuno<\/td><td><strong>PTV:<\/strong>\u00a0120 \u00b0C fino a 165 \u00b0C a 300 \u00b0C\/min (mantenimento 10 min) fino a 320 \u00b0C a 300 \u00b0C\/min (mantenimento 8 min).<br><br><strong>GC:<\/strong>\u00a0120 \u00b0C (mantenimento 0,5 min) fino a 200 C a 18,5\u00b0C\/min fino a 330 \u00b0C a 35 \u00b0C\/min (mantenimento 5 min).<\/td><\/tr><tr><td>Colonna<br>da 30 m<\/td><td><strong>PTV:<\/strong>\u00a085 \u00b0C fino a 165 \u00b0C a 300 \u00b0C\/min (mantenimento 10 min) fino a 320\u00b0C a<br>300 \u00b0C\/min (mantenimento 8 min).<br><br><strong>GC:<\/strong>\u00a085 \u00b0C (mantenimento 0,5 min) fino a 150 \u00b0C a 6 \u00b0C\/min fino a 180 \u00b0C a<br>12 \u00b0C\/min fino a 280 \u00b0C a 25 \u00b0C\/min (mantenimento 7 min).<\/td><td><strong>PTV:<\/strong>\u00a0120 \u00b0C fino a 165 \u00b0C a 300 \u00b0C\/min (mantenimento 10 min) fino a 320 \u00b0C a 300 \u00b0C\/min (mantenimento 8 min).<br><br><strong>GC:<\/strong>\u00a0120 \u00b0C (mantenimento 0,5 min) fino a 180 \u00b0C a 12 \u00b0C\/min fino a 330 \u00b0C a 25 \u00b0C\/min (mantenimento 5 min).<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n<p>La quantificazione \u00e8 stata effettuata utilizzando il metodo di calibrazione standard interno deuterato utilizzando l\u2019area degli ioni target&nbsp;acquisiti in modalit\u00e0 SIM (Single Ion Monitoring) per singolo quadrupolo o SRM (Selected Reaction Monitoring) per triplo quadrupolo.&nbsp;La Tabella II mostra gli ioni monitorati. Una curva di calibrazione ai minimi quadrati \u00e8 stata utilizzata per calcolare i LOD strumentali&nbsp;utilizzando la formula LOD = 3,3*s y\/k, dove k \u00e8 una pendenza della curva di calibrazione e s y \u00e8 l\u2019errore standard del predicato valore y&nbsp;per ogni valore x; s y \u00e8 stato ottenuto mediante una regressione lineare ai minimi quadrati.<\/p>\n\n\n\n<p><strong>Tabella II:<\/strong>&nbsp;Ioni acquisiti in modalit\u00e0 SIM monitorati con il metodo GC-MS e transizioni in modalit\u00e0 SRM monitorate con il metodo&nbsp;GC-MS\/MS per tutti gli analiti.<\/p>\n\n\n\n<figure class=\"wp-block-table\"><table class=\"has-fixed-layout\"><tbody><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"2\"><strong>Composto<\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" colspan=\"2\"><strong>Ioni monitorati mediante MS (SIM)<\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" colspan=\"3\"><strong>Transizioni ioniche monitorate mediante MS\/MS<\/strong><\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\"><strong>Ione 1<\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\"><strong>Ione 2<\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\"><strong>Ione precursore (m\/z)<\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\"><strong>Ione precursore (m\/z)<\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\"><strong>Energia di collisione (V)<\/strong><\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"3\">3-MCDP-d<sub>5<\/sub><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"3\">150<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"3\">201<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">150<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">93<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">12<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">201<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">93<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">24<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">201<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">150<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">8<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"3\">3-MCPD<sub>5<\/sub><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"3\">147<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"3\">196<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">147<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">91<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">12<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">196<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">91<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">24<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">196<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">147<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">8<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"3\">2-MCPD-d<sub>5<\/sub><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"3\">201<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"3\">203<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">201<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">104<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">22<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">201<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">107<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">12<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">203<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">107<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">12<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"3\">2-MCPD<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"3\">196<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"3\">198<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">196<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">104<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">14<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">198<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">91<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">8<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">198<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">104<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">14<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">3-MBPD-d<sub>5<\/sub><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">245<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">247<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" colspan=\"3\" rowspan=\"2\">N\/D &#8211; I composti del MBPD sono un prodotto della preparazione dei campioni secondo il metodo&nbsp;AOCS Cd 29b-13 che non \u00e8 avvenuta nello strumento MS\/MS.<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">3-MBPD<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">240<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">242<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Risultati e discussione<\/h2>\n\n\n\n<p>Nei casi in cui il tempo di analisi dello strumento \u00e8 maggiore di quello necessario per la preparazione di un campione, la riduzione del&nbsp;tempo di analisi potrebbe comportare un incremento della produzione. Persino se la fase di preparazione dei campioni \u00e8 pi\u00f9 lunga del&nbsp;tempo di analisi dello strumento conviene comunque cercare dei modi per accorciare il tempo di corsa. La riduzione dei tempi di analisi&nbsp;consente di condizionare pi\u00f9 a lungo la colonna tra le corse e comporta una potenziale diminuzione del consumo di gas grazie all\u2019utilizzo&nbsp;di funzioni di risparmio di gas o cambiamenti di metodi per ridurre il flusso di gas tra un\u2019analisi e l\u2019altra.<\/p>\n\n\n\n<p>Entrambi i metodi AOCS Cd 29b-13 e Cd 29c-13 seguono lo stesso programma di temperatura del GC e utilizzano il PTV in modalit\u00e0 splitless.&nbsp;La temperatura iniziale sia per il GC che per il PTV \u00e8 pari a 85 \u00b0C, ma visto che l\u2019intrappolamento del solvente non \u00e8 necessario quando il primo&nbsp;analita eluisce a 13 minuti a una velocit\u00e0 della rampa del forno relativamente bassa, \u00e8 stata considerata una temperatura dell\u2019iniettore e del&nbsp;forno pi\u00f9 elevata per determinare se il tempo di analisi potesse essere ridotto mediante programmi di temperatura dell\u2019iniettore e del forno di&nbsp;durata minore senza sacrificare le prestazioni. In base al calcolo del vapore solvente relativamente all&#8217;isoottano e a un liner da 2 mm, la temperatura massima in modalit\u00e0 splitless \u00e8 pari a 120 \u00b0C. Il campione utilizzato nell\u2019esperimento \u00e8 stato preparato fortificando il dipalmitato-3-MCPD&nbsp;nell\u2019EVOO a un livello di 5 mg\/kg. Al fine di trovare il punto di partenza migliore, consapevoli di voler prendere in considerazione temperature pi\u00f9 elevate e di non dover necessariamente cominciare alla temperatura iniziale pubblicata pari a 85 \u00b0C, la temperatura del forno e quella&nbsp;dell\u2019iniettore sono state aumentate con incrementi di 5 \u00b0C, da 95 \u00b0C a 120 \u00b0C. L\u2019analisi \u00e8 stata condotta sull\u2019MS a singolo quadrupolo e i picchi&nbsp;ottenuti nella modalit\u00e0 SIM sono stati confrontati quanto ad ampiezza e risoluzione. Ai fini del confronto abbiamo sottoposto a test sia l\u2019iniezione split che quella splitless.<\/p>\n\n\n\n<p><strong>Tabella III:<\/strong>&nbsp;Caratteristiche di picco del 3-MCPD derivatizzato con PBA a diverse temperature iniziali del forno e del PTV.<\/p>\n\n\n\n<figure class=\"wp-block-table\"><table class=\"has-fixed-layout\"><tbody><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"2\"><strong>Tecnica di iniezione<\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"2\"><strong>Temperatura iniziale<br>iniettore e forno (\u00b0C)<\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" colspan=\"2\"><strong>Tempo di ritenzione dei composti derivatizzati con<\/strong><br><strong>PBA (min)<\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" colspan=\"2\"><strong>Ampiezza del picco dei composti derivatizzati con<br>PBA (min)<\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"2\"><strong>Risoluzione<\/strong><\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\"><strong>3-MCPD-d<sub>5<\/sub><\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\"><strong>3-MCPD<\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\"><strong>3-MCPD-d5<\/strong><\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\"><strong>3-MCPD<\/strong><\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"6\">Splitless<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">95<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">8,03<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">8,07<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,03<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,035<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,762<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">100&nbsp;<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">7,62<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">7,66<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,022<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,034<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,864<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">105<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">7,22<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">7,26<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,023<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,021<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">1,126<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">110<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">6,82<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">6,86<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,023<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,022<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">1,075<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">115<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">6,42<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">6,46<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,025<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,025<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,944<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">120<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">6,04<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">6,07<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,027<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,027<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,830<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\" rowspan=\"6\">Split<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">95<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">8,03<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">8,07<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,02<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,028<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">1,033<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">100<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">7,62<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">7,66<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,02<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,019<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">1,241<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">105<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">7,22<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">7,26<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,021<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,019<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">1,209<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">110<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">6,82<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">6,86<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,019<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,019<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">1,273<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">115<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">6,43<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">6,47<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,019<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,019<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">1,242<\/td><\/tr><tr><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">120<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">6,04<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">6,00<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,019<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">0,018<\/td><td class=\"has-text-align-center\" data-align=\"center\">1,244<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n<p>Relativamente all\u2019iniezione splitless, i picchi erano di forma stretta per entrambi i composti, in un range di 105-110 \u00b0C, mentre le ampiezze&nbsp;del picco sono rimaste praticamente invariate a temperature di 100 \u00b0C e superiori nella modalit\u00e0 split (Tabella III). Attraverso l\u2019iniezione split&nbsp;si ottiene una buona forma del picco e sarebbe potenzialmente possibile ridurre la quantit\u00e0 di reagente di derivatizzazione sulla colonna;&nbsp;tuttavia, sorgerebbero naturalmente delle preoccupazioni su come raggiungere la sensibilit\u00e0 adeguata dato che l\u2019iniezione split \u00e8 considerata&nbsp;tradizionalmente come una tecnica per campioni a concentrazione pi\u00f9 elevata.<\/p>\n\n\n\n<p>Per valutare l\u2019effetto sulla sensibilit\u00e0 abbiamo messo a confronto i limiti di rilevabilit\u00e0 (LOD) acquisiti a una temperatura iniziale di 110 \u00b0C e&nbsp;120 \u00b0C per l\u2019iniezione splitless e 120 \u00b0C per quella split. La Figura 3 mostra il confronto delle curve di calibrazione relative alle iniezioni split&nbsp;e splitless (normalizzato a una risposta standard interna). I LOD sono risultati pari a 0,14 mg\/kg per l\u2019iniezione splitless e 0,13 mg\/kg per&nbsp;la modalit\u00e0 split. La tecnica di iniezione non ha effetto sulla pendenza o sui LOD: l\u2019iniezione split offre le stesse prestazioni di un\u2019iniezione&nbsp;splitless e viceversa. I picchi di forma pi\u00f9 stretta prodotti nelle iniezioni split sono pi\u00f9 alti, quindi la maggiore altezza del picco compensa la&nbsp;perdita nell&#8217;area del picco.<\/p>\n\n\n<div class=\"wp-block-custom-chromatogram-article-top\"><div class=\"chromatogram-article-placeholder\"><div class=\"figure-heading\"><strong>Figura 3:<\/strong>\u00a0Confronto tra le curve di calibrazione delle iniezioni splitless e split dei 3-MCPD derivatizzati normalizzati alla\u00a0risposta standard interna con 3-MCPD-d<sub>5<\/sub>\u00a0derivatizzati.<\/div><div class='chromatogram-article-inner-full'><div class=\"chromatogram-article-inner\">\n<style>.kb-image45315_3efa88-be .kb-image-has-overlay:after{opacity:0.3;}<\/style>\n<div class=\"wp-block-kadence-image kb-image45315_3efa88-be\"><figure class=\"aligncenter size-large\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"1024\" height=\"601\" src=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/\/figure-article-FSAN3303-03-1024x601.jpg\" alt=\"\" class=\"kb-img wp-image-20000\" title=\"-\" srcset=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-03-1024x601.jpg 1024w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-03-300x176.jpg 300w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-03-768x451.jpg 768w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-03-1536x901.jpg 1536w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-03.jpg 1800w\" sizes=\"auto, (max-width: 1024px) 100vw, 1024px\" \/><\/figure><\/div>\n\n<\/div><\/div><\/div>\n\n\n<p>Dal confronto tra l\u2019iniettore PTV a 120 \u00b0C e 280 \u00b0C e il normale iniettore split a 280 \u00b0C (Figura 4) non emergono neppure effetti sulle risposte del\u00a03-MCPD; tuttavia, con un iniettore PTV \u00e8 possibile contribuire ad aumentare la durata della colonna grazie alla possibilit\u00e0 di far fuoriuscire il\u00a0PBA dopo il trasferimento degli analiti sulla colonna. L\u2019utilizzo di una precolonna (per es. una precolonna Rxi da 5 m x 0,25 mm [<strong>cat. N\u00b0 10029<\/strong>]\u00a0o una precolonna Rxi da 10 m x 0,25 mm [<strong>cat. N\u00b0 10059<\/strong>]) invece di un iniettore PTV \u00e8 una valida alternativa.<\/p>\n\n\n<div class=\"wp-block-custom-chromatogram-article-top\"><div class=\"chromatogram-article-placeholder\"><div class=\"figure-heading\"><strong>Figura 4:<\/strong>\u00a0Il confronto delle curve di calibrazione per l\u2019iniezione split di 3-MCPD derivatizzati con iniettori e temperature diverse.<\/div><div class='chromatogram-article-inner-full'><div class=\"chromatogram-article-inner\">\n<style>.kb-image45315_d74046-42 .kb-image-has-overlay:after{opacity:0.3;}<\/style>\n<div class=\"wp-block-kadence-image kb-image45315_d74046-42\"><figure class=\"aligncenter size-large\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"1024\" height=\"815\" src=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/\/figure-article-FSAN3303-04-1024x815.jpg\" alt=\"\" class=\"kb-img wp-image-20006\" title=\"-\" srcset=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-04-1024x815.jpg 1024w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-04-300x239.jpg 300w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-04-768x611.jpg 768w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-04-1536x1222.jpg 1536w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-04.jpg 1800w\" sizes=\"auto, (max-width: 1024px) 100vw, 1024px\" \/><\/figure><\/div>\n\n<\/div><\/div><\/div>\n\n\n<p>I limiti di rilevabilit\u00e0 sono risultati ampiamente al di sotto dei limiti suggeriti per il 3-MCPD e i glicidil esteri (rispettivamente 2 e 1 mg\/kg).\u00a0Tuttavia, i glicidil esteri stanno acquistando sempre pi\u00f9 attenzione in particolare relativamente a formule per lattanti e alimenti per l\u2019infanzia;\u00a0pertanto potrebbe essere necessario un metodo pi\u00f9 sensibile. Per questo motivo abbiamo optato per l\u2019utilizzo del metodo GC-MS\/MS (Figura 5),\u00a0in base al quale il limite di rilevabilit\u00e0 strumentale \u00e8 sceso a 0,02 mg\/kg. In alternativa, il campione di calibrazione dal valore pi\u00f9 basso (12 \u00b5g\/kg)\u00a0ha un rapporto segnale\/rumore pari a 5:1 e potrebbe essere impiegato al posto di un limite di rilevabilit\u00e0 strumentale.<\/p>\n\n\n<div class=\"wp-block-custom-chromatogram-article-top\"><div class=\"chromatogram-article-placeholder\"><div class=\"figure-heading\"><strong>Figura 5:<\/strong>\u00a0Risultati dell\u2019analisi GC-MS\/MS del glicil stearato.<\/div><div class='chromatogram-article-inner-full'><div class=\"chromatogram-article-inner\">\n<style>.kb-image45315_3e5a63-72 .kb-image-has-overlay:after{opacity:0.3;}<\/style>\n<div class=\"wp-block-kadence-image kb-image45315_3e5a63-72\"><figure class=\"aligncenter size-large\"><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" width=\"1024\" height=\"280\" src=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/\/figure-article-FSAN3303-05-1024x280.jpg\" alt=\"\" class=\"kb-img wp-image-20012\" title=\"-\" srcset=\"https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-05-1024x280.jpg 1024w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-05-300x82.jpg 300w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-05-768x210.jpg 768w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-05-1536x420.jpg 1536w, https:\/\/discover.restek.com\/wp-content\/uploads\/figure-article-FSAN3303-05.jpg 1800w\" sizes=\"auto, (max-width: 1024px) 100vw, 1024px\" \/><\/figure><\/div>\n\n<\/div><\/div><\/div>\n\n\n<div style=\"height:20px\" aria-hidden=\"true\" class=\"wp-block-spacer\"><\/div>\n\n\n\n<h3 class=\"wp-block-heading\">Utilizzare software per esplorare ulteriori opportunit\u00e0 per l\u2019ottimizzazione dei metodi<\/h3>\n\n\n\n<p>La versione online del software Restek Pro&nbsp;<em>EZ<\/em>GC \u00e8 uno strumento di selezione che si basa su una libreria precaricata di indici di ritenzione&nbsp;termodinamici e consente di prevedere i tempi di ritenzione e ottimizzare i metodi cromatografici senza dover analizzare serie di composti in&nbsp;svariate condizioni differenti. Il software Pro&nbsp;<em>EZ<\/em>GC seleziona la fase stazionaria regolando contemporaneamente lo spessore del film, la temperatura, la lunghezza e il diametro interno della colonna, come pure il flusso. Gli utenti possono inserire ogni composto o copiare\/incollare nel&nbsp;programma lunghi elenchi di composti.<\/p>\n\n\n\n<p>Al fine di ottimizzare ulteriormente il metodo GC, abbiamo deciso di creare e utilizzare una nuova libreria Pro&nbsp;<em>EZ<\/em>GC concentrando l\u2019attenzione sul MCPD e sui glicidil esteri dopo l\u2019idrolisi e la derivatizzazione. I glicidil esteri possono essere analizzati come 3-MCPD o 3-MBPD,&nbsp;entrambi presenti nel modello. Se decidete di eseguire delle analisi personalmente, ricordatevi sempre di impostare la pressione in uscita dalla&nbsp;colonna in \u201cvuoto\u201d, anzich\u00e9 pressione Atm!\u201d La soluzione iniziale offerta dallo strumento Pro&nbsp;<em>EZ<\/em>GC utilizza una rampa di temperatura e&nbsp;prevede l\u2019eluizione dell\u2019ultimo analita (3-MBPD) in poco pi\u00f9 di 5 minuti utilizzando una colonna Rxi 17-Sil MS da 20 m x 0,18 mm x 0,18 \u00b5m.&nbsp;Tuttavia, desideravamo mantenere il programma di temperatura a due rampe, quindi siamo partiti usando un tool che ci ha dato i parametri&nbsp;di partenza\u2014il Method Translator&nbsp;<em>EZ<\/em>GC\u2014 e portato poi i parametri su un altro tool, Pro&nbsp;<em>EZ<\/em>GC, per ottimizzarli. Abbiamo cos\u00ec ottenuto un&nbsp;nuovo programma di temperatura GC pi\u00f9 veloce in grado di analizzare tutti gli analiti in meno di cinque minuti (Figura 6).<\/p>\n\n\n<div class=\"wp-block-custom-chromatogram-article-top\"><div class=\"chromatogram-article-placeholder\"><div class=\"figure-heading\"><strong>Figura 6:<\/strong>\u00a0Confronto tra un cromatogramma modello Pro vGC e un cromatogramma reale per l\u2019analisi veloce del MCPD. Picchi: 1. 3-MCPD-d<sub>5<\/sub>\u00a0derivatizzato con PBA; 2. 3-MCPD derivatizzato con PBA; 3. 2-MCPD-d<sub>5\u00a0<\/sub>derivatizzato con PBA; 4.\u00a02-MCPD derivatizzato con PBA;\u00a05. 3-MBPD-d<sub>5\u00a0<\/sub>derivatizzato con PBA; e 6. 3-MBPD derivatizzato con PBA<\/div><div class='chromatogram-article-inner-full'><div class=\"chromatogram-article-inner\">\n<div class=\"wp-block-custom-chromatogram-article\"><div class=\"wp-block-custom-chromatogram-article\"><div class=\"chromatogram-image regular-image\"><img decoding=\"async\" src=\"https:\/\/ez.restek.com\/images\/cgram\/gc_fs0571.png\" alt=\"Fast Analysis of 3-MCPD and 2-MCPD on Rxi-17Sil MS\" title=\"-\"><\/div><p class=\"article-id\" style=\"text-align:center\"> GC_FS0571<\/p><div class=\"chromatogram-peaks\"><h4>Peaks<\/h4><table class=\"peaks col-lg-6 col-12\">\n<thead><tr><th><\/th><th style=\"text-align: left;width: 75px\">Peaks<\/th><th style=\"text-align: center;width: 75px\">t<sub>R<\/sub> (min)<\/th><th style=\"text-align: center;width: 75px\">Conc.<br \/>(ng\/mL)<\/th><\/tr><\/thead>\n<tbody><tr><td class=\"num\">1.<\/td><td class=\"cmpd\"><a class=\"cmpd_link\" title=\"View compound information for 3-MCPD-d5 PBA derivative\" href=\"https:\/\/ez.restek.com\/compound\/view\/en\/342611-01-2\/3-MCPD-d5 PBA derivative\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">3-MCPD-d5 PBA derivative<\/a><\/td><td class=\"oth\">4.143<\/td><td class=\"oth\">100<\/td><\/tr>\n<tr><td class=\"num\">2.<\/td><td class=\"cmpd\"><a class=\"cmpd_link\" title=\"View compound information for 3-MCPD PBA derivative\" href=\"https:\/\/ez.restek.com\/compound\/view\/en\/96-24-2\/3-MCPD PBA derivative\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">3-MCPD PBA derivative<\/a><\/td><td class=\"oth\">4.169<\/td><td class=\"oth\">200<\/td><\/tr>\n<tr><td class=\"num\">3.<\/td><td class=\"cmpd\"><a class=\"cmpd_link\" title=\"View compound information for 2-MCPD-d5 PBA derivative\" href=\"https:\/\/ez.restek.com\/compound\/view\/en\/1216764-05-4\/2-MCPD-d5 PBA derivative\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">2-MCPD-d5 PBA derivative<\/a><\/td><td class=\"oth\">4.388<\/td><td class=\"oth\">100<\/td><\/tr>\n<tr><td class=\"num\">4.<\/td><td class=\"cmpd\"><a class=\"cmpd_link\" title=\"View compound information for 2-MCPD PBA derivative\" href=\"https:\/\/ez.restek.com\/compound\/view\/en\/497-04-1\/2-MCPD PBA derivative\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">2-MCPD PBA derivative<\/a><\/td><td class=\"oth\">4.418<\/td><td class=\"oth\">100<\/td><\/tr>\n<\/tbody><\/table><\/div><div class=\"chromatogram-conditions\"><h4>Conditions<\/h4><div class=\"conditions-container container-fluid\"><div class=\"row\"><table class=\"conditions col-lg-6 col-12\"><tr><th class=\"conditions_header\" scope=\"row\">Column<\/th><td>Rxi-17Sil MS, 20 m, 0.18 mm ID, 0.18 \u00b5m (<a target=\"_blank\" href=\"https:\/\/www.restek.com\/p\/14102?utm_source=chromatograms&amp;utm_medium=link&amp;utm_campaign=GC_FS0571\" rel=\"noopener\">cat.# 14102<\/a>)<\/td><\/tr><tr class=\"cgram_header_row\"><th class=\"conditions_header\" scope=\"row\">Standard\/Sample<\/th><td>See notes<\/td><\/tr>\n<tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Diluent:<\/th><td>Isooctane<\/td><\/tr><tr class=\"cgram_header_row\"><th class=\"conditions_header\" scope=\"row\">Injection<\/th><td><\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Inj. Vol.:<\/th><td>1 \u00b5L PTV split (split ratio 10:1)<\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Liner:<\/th><td>Topaz 2.0 mm ID straight inlet liner w\/wool (<a target=\"_blank\" href=\"https:\/\/www.restek.com\/p\/23314?utm_source=chromatograms&amp;utm_medium=link&amp;utm_campaign=GC_FS0571\" rel=\"noopener\">cat.# 23314<\/a>)<\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Inlet Temp. Program:<\/th><td>120 &#176;C to 165 &#176;C at 300 &#176;C\/min (hold 10 min) to 320 &#176;C at 300 &#176;C\/min (hold 8 min)<\/td><\/tr><tr class=\"cgram_header_row\"><th class=\"conditions_header\" scope=\"row\" colspan=\"2\">Oven<\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Oven Temp.:<\/th><td>120 &#176;C (hold 0.5 min) to 200 &#176;C at 18.5 &#176;C\/min to 330 &#176;C at 35 &#176;C\/min<\/td><\/tr><tr class=\"cgram_header_row\"><th class=\"conditions_header\" scope=\"row\">Carrier Gas<\/th><td>He, constant flow<\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Flow Rate:<\/th><td>1 mL\/min<\/td><\/tr><\/table><table class=\"conditions col-lg-6 col-12\"><tr><th class=\"conditions_header\" scope=\"row\">Detector<\/th><td>MS<\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Mode:<\/th><td>SIM<\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">SIM Program:<\/th><td colspan=\"2\">147, 150, 196, 201 m\/z, 50 ms dwell<\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Transfer Line Temp.:<\/th><td>320 \u00b0C<\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Analyzer Type:<\/th><td>Quadrupole <\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Source Type:<\/th><td>Inert <\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Source Temp.:<\/th><td>230 \u00b0C<\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Quad Temp.:<\/th><td>150 \u00b0C<\/td><\/tr><tr><th class=\"sub conditions_header\" scope=\"row\">Ionization Mode:<\/th><td>EI <\/td><\/tr><tr class=\"cgram_header_row\"><th class=\"conditions_header\" scope=\"row\">Instrument<\/th><td>Agilent 7890A GC &amp; 5975C MSD<\/td><\/tr><tr class=\"cgram_header_row\"><th class=\"conditions_header\" scope=\"row\">Sample Preparation<\/th><td>Standards were derivatized with 20 \u00b5L phenylboronic acid (saturated solution in diethyl ether), dried, and then reconstituted in 1 mL isooctane. Final concentrations are given in the peak table.<\/td><\/tr><tr class=\"cgram_header_row\"><th class=\"conditions_header\" scope=\"row\">Notes<\/th><td>Compounds and retention times in the peak list are from the actual chromatographic analysis. PBA derivatives of 3-MBPD-d5 and 3-MBPD were included in the Pro <i>EZ<\/i>GC model, but not in the experimental analysis. <\/td><\/tr><\/table><\/div><\/div><\/div><div class=\"chromatogram-pdf-link\"><a href=\"https:\/\/ez.restek.com\/images\/cgram\/gc_fs0571.pdf\" target=\"_blank\" rel=\"noopener noreferrer\"><svg xmlns=\"http:\/\/www.w3.org\/2000\/svg\" width=\"18\" height=\"18\" viewBox=\"0 0 18 18\"><g data-name=\"Group 2996\"><path data-name=\"Rectangle 1246\" d=\"M0 0h18v18H0z\" style=\"fill: none;\"><\/path><\/g><g data-name=\"Group 2997\"><path data-name=\"Path 729\" d=\"M13.412 11.4v2.017H5.345V11.4H4v2.017a1.349 1.349 0 0 0 1.345 1.345h8.068a1.349 1.349 0 0 0 1.345-1.345V11.4zm-.672-2.694-.948-.948-1.741 1.735V4H8.706v5.493L6.965 7.758l-.948.948 3.361 3.361z\" transform=\"translate(-.437 -.414)\" style=\"fill: rgb(13, 123, 196);\"><\/path><\/g><\/svg>Download PDF<\/a><\/div><\/div><\/div>\n<\/div><\/div><\/div>\n\n\n<div style=\"height:20px\" aria-hidden=\"true\" class=\"wp-block-spacer\"><\/div>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Conclusioni<\/h2>\n\n\n\n<p>Abbiamo esaminato le strategie di ottimizzazione e sviluppato un metodo GC-MS indiretto e migliorato per l\u2019analisi del 3-MCPD e dei glicidil&nbsp;esteri con cui abbiamo ottenuto migliori forme del picco senza effetti negativi sulla risoluzione. Il programma di temperatura ottimizzato empiricamente ha consentito una riduzione del tempo di analisi di 8 minuti, mentre con il metodo generato utilizzando il software del modellatore&nbsp;di cromatogrammi Pro&nbsp;<em>EZ<\/em>GC \u00e8 possibile risparmiare fino a 20 minuti. Utilizzando l\u2019iniezione split anzich\u00e9 il metodo splitless non ha influito&nbsp;negativamente sui limiti di rilevabilit\u00e0 e offre il vantaggio di estendere potenzialmente la durata della colonna in quanto vi entra una quantit\u00e0&nbsp;minore di reagente di derivatizzazione. Anche la scelta di un normale iniettore split\/splitless al posto di un PTV non ha avuto effetti negativi&nbsp;sulle prestazioni; tuttavia \u00e8 consigliabile l&#8217;utilizzo di una precolonna. Infine, l\u2019utilizzo di un metodo GC-MS\/MS ha comportato un miglioramento significativo dei limiti di rilevabilit\u00e0.<\/p>\n\n\n\n<h2 class=\"wp-block-heading\">Bibliografia<\/h2>\n\n\n\n<ol class=\"wp-block-list\">\n<li>World Health Organization, Joint FAO\/WHO Expert Committee on Food Additives, November 2016.\u00a0<a href=\"http:\/\/www.fao.org\/3\/a-bq821e.pdf\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">http:\/\/www.fao.org\/3\/a-bq821e.pdf<\/a><\/li>\n\n\n\n<li>A.P. Arisseto, W.C. Silva, R.G. Tivanello, K.A. Sampaio, E. Vicente, Recent advances in toxicity and analytical methods of monochloropropanediols and glycidyl fatty acid esters in food, Current Opinion in Food Science 24 (2018) 36-42.\u00a0<a href=\"https:\/\/www.sciencedirect.com\/science\/article\/abs\/pii\/S2214799318300675\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">https:\/\/www.sciencedirect.com\/science\/article\/abs\/pii\/S2214799318300675<\/a><\/li>\n\n\n\n<li>T.D. Haines, K.J. Adlaf, R.M. Pierceall, I. Lee, P. Venkitasubramanian, M.W. Collison, Direct determination of MCPD fatty acid esters and glycidyl fatty acid esters in vegetable oils by LC\u2013TOFMS, J Am Oil Chem Soc 88(1) (2011) 1-14.\u00a0<a href=\"https:\/\/www.ncbi.nlm.nih.gov\/pmc\/articles\/PMC3022155\/\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">https:\/\/www.ncbi.nlm.nih.gov\/pmc\/articles\/PMC3022155\/<\/a><\/li>\n\n\n\n<li>European Food Safety Authority, Revised safe intake for 3-MCPD in vegetable oils and food, 10 January 2018.\u00a0<a href=\"https:\/\/www.efsa.europa.eu\/en\/press\/news\/180110\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">https:\/\/www.efsa.europa.eu\/en\/press\/news\/180110<\/a><\/li>\n\n\n\n<li>EU considers maximum limits for 3-MCPD and 3-MPDEs in oils and fats, Oils &amp; Fats International, 23 July 2019.\u00a0<a href=\"https:\/\/www.ofimagazine.com\/news\/eu-considers-maximum-limits-for-3-mcpd-and-3-mpdes-in-oils-and-fats\" target=\"_blank\" rel=\"noopener\">https:\/\/www.ofimagazine.com\/news\/eu-considers-maximum-limits-for-3-mcpd-and-3-mpdes-in-oils-and-fats<\/a><\/li>\n<\/ol>\n\n\n\n<div style=\"height:50px\" aria-hidden=\"true\" class=\"wp-block-spacer\"><\/div>\n\n\n        <div class=\"cpb\">\n            <h3 class=\"cpb-heading\">Products Mentioned<\/h3>\n            <hr class=\"cpb-heading-underline\" \/>\n            <div class=\"cpb-list\">\n                                    <div class=\"cpb-item\">\n                        <div class=\"cpb-col cpb-col--left\">\n                            <a class=\"cpb-catalog\" target=\"_blank\" rel=\"noopener noreferrer\" href=\"https:\/\/www.restek.com\/p\/14123\">                                Catalog No. 14123                            <\/a>                        <\/div>\n                        <div class=\"cpb-col cpb-col--middle\">\n                            <div class=\"cpb-title\">Colonna capillare GC Rxi-17Sil MS, 30 m, ID 0,25 mm, 0,25 \u00b5m<\/div>\n                        <\/div>\n                        <div class=\"cpb-col cpb-col--right\">\n                                                            <a class=\"cpb-view-btn\" target=\"_blank\" rel=\"noopener noreferrer\" href=\"https:\/\/www.restek.com\/p\/14123\">Esplora Prodotto<\/a>\n                                                    <\/div>\n                    <\/div>\n                                    <div class=\"cpb-item\">\n                        <div class=\"cpb-col cpb-col--left\">\n                            <a class=\"cpb-catalog\" target=\"_blank\" rel=\"noopener noreferrer\" href=\"https:\/\/www.restek.com\/p\/14102\">                                Catalog No. 14102                            <\/a>                        <\/div>\n                        <div class=\"cpb-col cpb-col--middle\">\n                            <div class=\"cpb-title\">Colonna capillare GC Rxi-17Sil MS, 20 m, ID 0,18 mm, 0,18 \u00b5m<\/div>\n                        <\/div>\n                        <div class=\"cpb-col cpb-col--right\">\n                                                            <a class=\"cpb-view-btn\" target=\"_blank\" rel=\"noopener noreferrer\" href=\"https:\/\/www.restek.com\/p\/14102\">Esplora Prodotto<\/a>\n                                                    <\/div>\n                    <\/div>\n                                    <div class=\"cpb-item\">\n                        <div class=\"cpb-col cpb-col--left\">\n                            <a class=\"cpb-catalog\" target=\"_blank\" rel=\"noopener noreferrer\" href=\"https:\/\/www.restek.com\/p\/23316\">                                Catalog No. 23316                            <\/a>                        <\/div>\n                        <div class=\"cpb-col cpb-col--middle\">\n                            <div class=\"cpb-title\">Topaz Inlet Liner a Cono Singolo, 2,0 mm x 6,5 x 78,5 per GC Agilent, con Lana di Quarzo, Deattivazione Premium, 5 pz.<\/div>\n                        <\/div>\n                        <div class=\"cpb-col cpb-col--right\">\n                                                            <a class=\"cpb-view-btn\" target=\"_blank\" rel=\"noopener noreferrer\" href=\"https:\/\/www.restek.com\/p\/23316\">Esplora Prodotto<\/a>\n                                                    <\/div>\n                    <\/div>\n                                    <div class=\"cpb-item\">\n                        <div class=\"cpb-col cpb-col--left\">\n                            <a class=\"cpb-catalog\" target=\"_blank\" rel=\"noopener noreferrer\" href=\"https:\/\/www.restek.com\/p\/23438\">                                Catalog No. 23438                            <\/a>                        <\/div>\n                        <div class=\"cpb-col cpb-col--middle\">\n                            <div class=\"cpb-title\">Liner per iniettore baffled Topaz, 2,0 mm x 2,75 x 120, per GC Thermo TRACE, deattivazione premium, 5 pz.<\/div>\n                        <\/div>\n 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